载AgNPs聚电解质多层膜在纯钛表面的构建及其性能研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lhm136
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目的:  利用LbL技术在碱处理的纯钛表面构建载AgNPs的CS-肝素聚电解质多层膜,并对其理化性能、细胞相容性和抗菌性能进行表征,探索一种有利于牙龈胶原纤维附着且具有一定抗菌性的牙种植体穿龈表面结构,为牙种植体颈部设计提供一定的实验指导。  材料和方法:  1、在 CS 作为还原剂和稳定剂的条件下水热法制备出 AgNPs ,通过UV-VIS-NIR对其进行表征,TEM对其进行形貌和尺寸检测。  2、抛光钛片表面经过热碱处理活化后,利用 LbL 技术在其表面构建CS/AgNPs-Heparin聚电解质多层膜(PEMs)。采用AFM、FESEM、SEM-EDX、XPS、XRD和接触角测试对PEMs理化性能进行表征。  3、在抛光Ti (Ti)、热碱处理Ti(Ti-OH)和PEMs构建的Ti (Ti-PEMs)表面培养HGFs来评价PEMs构建后的细胞相容性,采用细胞计数法、CCK-8、SEM和免疫荧光对细胞的早期粘附能力、增殖能力进行检测以及细胞的形态进行观察。  4、采用ICP-AES来研究Ti-PEMs组Ag+的缓释情况。选取S. aureus和E. coli以及种植体周围炎的主要致病菌P. gingivalis进行体外抗菌实验。采用平板菌落计数法来检测PEMs构建后Ti片对S. aureus和E. coli的抗菌效果;采用平板涂布法和SEM观察进一步检测PEMs构建后Ti片对P. gingivalis的抗菌能力。结果:  1、UV-VIS-NIR结果显示在420 nm处出现了AgNPs的特征吸收峰,表明CS/AgNO3溶液在加热条件下成功制备出AgNPs。TEM结果显示AgNPs为球形,粒径大小在10~20 nm之间。  2、Ti表面碱处理构建PEMs后,SEM-EDX、XPS结果显示表面出现了S 和Ag0,表明成功构建了CS/AgNPs-Heparin聚电解质多层膜。AFM、FESEM结果显示各组试样表面形貌变化;AFM 测得各组试样表面的粗糙度:Ti 组 Ra=46.625±2.325 nm、Ti-OH 组 Ra=92.875±18.505 nm、Ti-PEMs 组 Ra=59.827±13.257 nm。接触角测试结果表明碱处理及PEMs构建后钛片的亲水性及表面自由能均得到提高。  3、PEMs构建后的钛片促进了HGFs的早期粘附、增殖和形态铺展,展现出良好的细胞相容性。  4、ICP-AES结果表明Ag+的持续释放可达28天。PEMs组装后的钛片使S. aureus和E. coli数量明显减少,到第7天对S. aureus和E. coli的抗菌率都超过85%。平板涂布法和SEM结果显示,1和4d 时PEMs构建后的钛片表面P. gingivalis的数量明显减少;SEM观察到PEMs构建后的钛片表面部分P. gingivalis的胞体发生破裂。因此,结果证明PEMs构建后的钛片具有优良的抗菌性能。结论:  利用LbL技术可在碱活化的纯钛表面成功构建载AgNPs的PEMs,其表面无细胞毒性,可促进细胞的粘附和增殖,同时具有良好的抗菌性能,为牙种植体颈部软组织的封闭和抗感染提供了一种新的思路和方法。
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