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目的：建立HIV—1原代毒株包膜伪病毒中和试验体系，利用该体系对HIV—1感染者血浆及原代HIV—1包膜伪病毒进行中和试验，初步筛选诱导HIV—1感染者产生高水平广谱中和抗体的包膜免疫原。
方法：首先亚克隆获得带HIV—1原代毒株包膜的表达质粒pCDNA3.1—env，用pSG3△env和pCDNA3.1—env双质粒共转染293T细胞构建包膜伪病毒。用HIV—1感染者血浆进行伪病毒中和试验，建立中和试验体系。利用该体系对10个HIV—1感染者血浆和10个伪病毒进行中和试验。计算出半数抑制浓度，比较血浆/病毒的中和程度初步筛选能诱生广谱中和抗体的HIV—1包膜。
结果：通过亚克隆技术构建了8株携有原代包膜基因的pCDNA3.1—env真核表达质粒。利用pSG3△env和pCDNA3.1—evn双质粒共转染293T细胞构建包膜伪病毒法构建了8株原代包膜伪病毒和2株实验室株包膜伪病毒，并对其进行了滴定，测定了其TCID50。利用伪病毒中和试验对伪病毒进行初筛，其结果显示编号为V7的伪病毒可被半数以上的HIV—1感染者血浆中和(ID50>100)。利用中和试验对HIV—1感染者血浆进行初筛，在10名HIV—1感染者血浆中，P1、P7、P9这3个血浆的中和抗体滴度相对较高，其中P7和P1具有较广泛的中和作用，而P9的高中和抗体滴度是由于对个别伪病毒的高中和敏感性所致。
结论：建立了HIV—1原代毒株包膜伪病毒中和试验的平台，为进一步扩大筛选奠定了技术和方法学基础。利用该中和试验体系，初步筛选出。V7这一能被半数以上HIV—1感染者血浆中和的包膜伪病毒，可能作为进一步获得能诱生广谱中和抗体的候选包膜免疫原。同时初步筛选出P1和P7两个能够中和半数以上伪病毒的感染者血浆，为进一步从其中获取能诱生广谱中和抗体的候选包膜免疫原提供基础。