论文部分内容阅读
热应激是影响鸡生产性能的重要应激因子，提高鸡的耐热性能是热带地区和我国南方地区育种目标之一。本研究以体重相近(1.65±0.13kg)的Anak40混合家系母鸡(n=55)为试验材料，61-65日龄置于24-28℃、RH50%的环境进行预饲，66日龄室温快速提升至(35±1)℃，并以此时作为热应激起始(0h)。0、6、18、30、42、54和66h时测定每只母鸡的直肠温度。66h时快速升温至(41±1)℃，记录每只母鸡热死亡时间(HSST)和热致死温度(LRT)。各时间点直肠温度和热致死温度与起始直肠温度的差值分别记为~△Tn（~△T6、~△T18、~△T30、~△T42、~△T54、~△T66）和~△TT。结果表明，HSST与~△T18和~△TT均呈显著负相关(r~△~△T18=-0.277，r~△TT=-0.314；P<0.05)，而与T30、~△T42和~△T54均呈极显著负相关(r~△T30=-0.362，r~△T42=-0.385，r~△T54=-0.559；P<0.01)。同时，~△T18较小（平均数-1/2标准差）的母鸡的HSST(256.0±208.4min)显著(P<0.05)高于大于~△T18较大（平均数+1/2标准差）的母鸡(123.7±78.3min)。因此，~△T18作为鸡耐热力的评价指标是可行的。从60日龄的Anak40同胞家系中随机选择12只母鸡，分为三组（G1，G2，G3），每组4只，同一鸡舍饲养，环境温度(25±1)℃。G1组作为对照组，G2组为(35±1)℃热应激24h，G3组为热应激24h后恢复至对照组温度并持续24h。分别取肝脏组织，提取12个样本的RNA并进行芯片杂交，获得12张44K的安捷伦全基因组表达谱芯片。结果表明，有235条基因表达发生2倍以上变化。对这些基因进行基因本体(geneontology)信息生理功能(biological process)分类，共分为16类。其中14条基因与DNA代谢有关(DNA metabolic process，6； DNA replication，5； transcription,DNA-dependent，3)，8条基因与刺激应答相关(response to monosaccharide stimulus，2；response to glucose stimulus，2；response to carbohydrate stimulus，2；response tohexose stimulus，2)，7条基因与代谢相关(monosaccharide metabolic process，4；fattyacid metabolic process，3)，5条基因与生物合成相关(RNA biosynthetic process，3；regulation of receptor biosynthetic process，2)，6条修正基因(histone modification，3；covalent chromatin modification，3)，其他基因9条(chromosome organization，5；histoneH3acetylation，2；organelle fusion，2)。去掉重复基因，共有16条。KEGG Pathway分析可将差异表达基因分为4类：Galactose metabolism、Glycolysis/Gluconeogenesis、Pyruvate metabolism、Glycerolipid metabolism，共8条基因。HSP基因家族中，只有HSP60表达量发生2倍以上的表达(2.35，P<0.05)。综上，本研究获得一个鸡耐热性的评价指标，锁定鸡耐热性相关的候选基因23条，为进一步研究热应激遗传机制及分子标记奠定基础。