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化学发光分析法具有灵敏度高、较宽的线性范围、仪器价格便宜、操作方便、测定快速等特点,近年来成为迅速发展的化学分析方法之一。化学发光分析法、流动注射技术与电子技术相结合,实现了实验操作中进样的机械化与自动化,提高了化学发光体系的稳定性和分析结果的灵敏度及重现性,形成了流动注射化学发光分析新技术。流动注射化学发光分析法广泛应用于环境科学、化工生产、生命科学、医学和食品科学等领域,如:利用流动注射化学发光法,实现对环境污染物的实时、在线监测,为环境保护提供了良好的监测手段;在化工生产中,可以实现对某一化学产品的含量进行质量控制,也可以实现对生产车间内的有害气体监控;在医药方面,可检测医药中某种成分的含量;也可用于药代机理和药效等方面的研究;目前文献报道的生物发光传感器可以完成对某些生物活性分子的活体(invivo)、实时(realtime)、在线(online)测定,如测定生物体内的糖类、蛋白质、核酸和生物激素等。
本研究论文利用流动注射化学发光分析法,对几种重要的药物及环境污染物进行了分析方法研究,主要包括如下内容:
1.鲁米诺-高碘酸钾化学发光增强法测定对苯二酚在碱性介质中,高碘酸钾氧化鲁米诺产生化学发光,对苯二酚对此反应具有极强的增敏作用,据此建立了鲁米诺-高碘酸钾-对苯二酚化学发光体系测定对苯二酚的新方法。此方法具有基线稳定、峰形好、线性范围宽、重现性好、抗干扰能力强、灵敏度高的优点。对苯二酚的浓度在8-0×10-9~1.5×10-7mol/L范围内与相对化学发光强度呈良好线性关系,检出限为5.0×10-9mol/L,相对标准偏差为0.57%;用于河水中对苯二酚的测定,结果满意;并初步探讨了对苯二酚的增敏机理。
2.鲁米诺-高碘酸钾化学发光增强法测定了均苯三酚在碱性条件下,高碘酸钾氧化鲁米诺产生化学发光,均苯三酚对此反应具有强的增敏作用,据此建立了鲁米诺-高碘酸钾-均苯三酚化学发光体系测定均苯三酚的新方法。均苯三酚的浓度在2.0×10-7~1.0×10-5mol/L范围内与相对化学发光强度△Ⅰ呈良好的线性关系,检出限为7.8×10-8mol/L,用1.0×10-6mol/L浓度的均苯三酚六次测定的相对标准偏差为1.49%;已用于实验室废水中均苯三酚的测定。
3.鲁米诺-高碘酸钾化学发光抑制法测定甲硝唑在酸性介质中,高锰酸钾氧化鲁米诺能够产生稳定的化学发光,甲硝唑对该体系有一定的抑制作用。据此建立了流动注射化学发光抑制法测定甲硝唑的新方法。甲硝唑浓度在1.00×10-5~1.42×10-4mol/L范围内,相对化学发光强度△Ⅰ与甲硝唑浓度的对数呈良好的线性关系,方法的检出限(3σ)为8.43×106mol/L。对浓度为1.40×10-4mol/L甲硝唑进行11次测定,相对标准偏差为1.87%。方法应用于片剂中甲硝唑含量的测定,结果满意。
4.铁氰化钾直接氧化法测定水样中邻苯三酚
在碱性介质中,铁氰化钾直接氧化邻苯三酚产生化学发光,结合流动注射技术建立了一种测定邻苯三酚的化学发光新方法。该体系的化学发光强度与邻苯三酚的浓度在1.0×10-4~9.0×10-4mol/L和9.0×10-4~9.0×10-3mol/L范围内呈线性关系,邻苯三酚的检出限(3σ)为7.5×10-5mol/L,对浓度为1.0×10-3mol/L的邻苯三酚平行测定11次,相对标准偏差(RSD)为1.58%,用于湖水中的邻苯三酚的测定。
5.铁氰化钾-鲁米诺体系的化学发光抑制法测定双酚A环境调查和医学实验结果表明,环境中的残留双酚A能引起人类和野生动物内分泌系统的失调,如雄性动物的雌性化,造成动物繁殖能力下降,影响了大自然的生态平衡,是危害极其严重的环境污染物。本实验研究表明,双酚A对鲁米诺-铁氰化钾化学发光反应体系的化学发光具有抑制作用,建立了一种测定环境雌激素双酚A的流动注射化学发光分析新方法;双酚A的浓度在8.0×10-7~1.0×10-5mol/L范围内与△Ⅰ呈良好的线性关系,检出限为3.1×10-7mol/L,应用于聚碳酸酯塑料水溶出液中双酚A的测定,结果满意。并讨论了有关反应机理。
6.高锰酸钾-酸性铬蓝K化学发光体系的研究
本实验发现,在氢氧化钠溶液中,高锰酸钾氧化酸性铬蓝K产生较强的化学发光,Ca2+、Mg2+、Ba2+离子对此发光体系具有明显的增强作用,实验得出了钙、镁、钡和酸性铬蓝K的工作曲线、检出限等,为这些金属元素的检测提供了理论基础,初步探讨了此发光体系的反应特征及发光机理,测得高锰酸钾-酸性铬蓝K发光体系的发射波长为660nm。
7.高锰酸钾-酸性铬蓝K化学发光体系间接测定叶绿素在碱性条件下,高锰酸钾氧化酸性铬蓝K产生较强的化学发光,镁离子对此体系的发光具有较强的增强作用,在5.0×10-6~1.0×10-4mol/L范围内,镁离子浓度与体系的相对发光强度呈线性关系,相关系数为0.9993,方法检出限(3σ)为3.0×10-6mol/L。对2.0×10-5mol/L的镁离子11次测定,相对标准(RSD)为0.85%。通过测定脱镁叶绿素提取液中镁离子浓度,计算出叶绿素在植物叶子中的含量,建立了间接测定叶绿素的化学发光分析新方法,应用于三叶草、黑麦草和早熟禾叶子中叶绿素的测定,结果满意。