rhIFN-α、rhIL-2抗血管生成的实验研究

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目的研究rhIFN-α、rhIL-2对血管内皮细胞的细胞和分子调控机制,探讨其是否具有协同作用,为临床使用上述细胞因子治疗恶性肿瘤及白血病等恶性血液病提供实验依据。方法实验以体外原代培养的人脐静脉内皮细胞作为靶细胞,进行以下方面的研究: 1.rhIFN-α、rhIL-2对血管内皮细胞增殖的影响(1)人脐静脉内皮细胞分离、培养及鉴定。(2)采用MTT法,筛选出rhIFN-α、rhIL-2作用于HUVECs的有效作用浓度和时间。2. rhIFN-α、rhIL-2对血管内皮细胞细胞周期的调控作用采用流式细胞术,观察rhIFN-α、rhIL-2及其合用对血管内皮细胞细胞周期DNA合成期(S期)的影响。3. rhIFN-α、rhIL-2对血管内皮细胞迁移率的影响采用琼脂糖刮除实验,观察rhIFN-α、rhIL-2及其合用对HUVECs细胞迁移抑制率的影响。4. rhIFN-α、rhIL-2对血管内皮细胞分泌VEGF的影响采用酶联免疫吸附实验(ELISA),观察rhIFN-α、rhIL-2及其合用对HUVECs分泌VEGF的影响。5. rhIFN-α、rhIL-2对血管内皮细胞VEGFmRNA表达的影响
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