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目的本研究通过观察EGb76l在AFBl致大鼠肝癌的过程中对硫酸乙酰肝素类蛋白聚糖(MxR7)、环氧化酶(C0x-2)以及细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制蛋白(P16)的影响,探讨EGb761抑制AFBl致大鼠肝癌发生发展的可能机制。方法将71只大鼠随机分为3组:(1)AFB1组28只,喂正常饲料,于第3周开始腹腔注射AFBl,1～3次/周,每次100～200ug/1kg,第47周停止注射AFBl;(2)AFBl+EGb761组29只,喂含2g/kg EGb761的饲料,每天每只大鼠进食40～100mg,而AFBl注射的方法、时间及剂量与AFB1组相同;(3)对照组14只,喂正常饲料。于实验第64周处死各组所有剩余大鼠,常规留取肿瘤组织及各叶肝组织,立即用10%中性甲醛溶液固定24h后常规石蜡包埋,用于HE染色及免疫组化学染色,检测MXR7、P16、COx一2蛋白的表达。结果1. AFB1诱发大鼠肝癌发生情况在64周实验结束时,AFB1组有效动物数为25只,AFB1+EGb761组为26只,空白组为12只。AFB1组肝癌发生率为76%(19/25),显著高于AFB1+EGb761组(26.9%, 7/26,P=0.001)。对照组无肿瘤发生。2. EGb761对大鼠肝癌组织MXR7蛋白的影响MXR7蛋白表达阳性呈棕黄色,定位于细胞质中,阳性细胞呈散在或弥漫性分布。不同组比较,AFB1组MXR7蛋白含量为5.133±2.725,表达水平明显高于AFB1+EGb761组(1.488±1.178 ,P<0.001)和对照组(1.200±0.902 ,P<0.001 )。3. EGb761对大鼠肝癌组织P16蛋白的影响P16蛋白表达阳性呈棕黄色,定位于细胞质中,阳性细胞呈散在或弥漫性分布。不同组比较,AFB1组P16蛋白的表达水平为1.533±0.856,与AFB1+EGb761组(2.456±1.014 ,P=0.03 )和对照组(4.000±1.206 ,P<0.001 )比较有统计学意义。4. EGb761对大鼠肝癌组织COX-2蛋白的影响COX-2蛋白表达阳性呈棕黄色,定位于细胞质中,阳性细胞呈散在或弥漫性分布。不同组比较,AFB1组COX-2蛋白的表达水平为3.305±0.566,与AFB1+EGb761组(2.704±0.431, P=0.783)比较无统计学意义,与对照组(1.077±0.261, P=0.04)比较有意义。结论1. EGb761能抑制或延迟肝细胞增生性病变,使增生结节即癌前病变的形成明显减少或推迟,抑制或延迟癌前病变向癌发展。2. EGb761可能通过下调MXR7蛋白表达,抑制经典Wnt/β-连环蛋白通路的活性,降低大鼠肝癌发生和发展。3. EGb761能够干扰AFB1致大鼠肝癌细胞增殖周期,抑制DNA合成,提示抑制癌细胞增殖是EGb761发挥抗癌的细胞学基础之一。4. EGb761可能成为AFB1相关性肝癌的化学预防剂。