禽流感病毒PB1亚基473位缬氨酸和598位脯氨酸对流感病毒聚合酶活性影响的研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jizhejida
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二十世纪以来多次发生的流感病毒疫情,1918,1957,1968,2009以及零星感染人的H5N1病毒均含有禽来源的PB1,但是禽PB1对这些流感病毒的作用还不十分清楚,有证据表明含有禽PB1的聚合酶比含有人PB1的聚合酶在哺乳动物细胞中具有更高的聚合酶活性。但是这个机制并不清楚,因此找出贡献这种作用的位点就可以进一步解释和说明禽PB1的这种作用。  通过对一株禽来源H5N1病毒A/Cambodia/P0322095/2005(Cam)病毒聚合酶活性的研究,发现Cam病毒的PB1可以增强人来源H1N1病毒A/WSN/33 PB2627谷氨酸突变(WSN627E)病毒的聚合酶活性。通过突变实验找出了Cam PB1中473位缬氨酸和598脯氨酸与这个作用有关。随后的病毒实验也证明了这点:473位缬氨酸和598位脯氨酸突变可以增强WSN627E病毒在哺乳动物细胞以及小鼠体内的复制能力;这两个点突变也可以明显降低突变病毒Cam473L598L,在哺乳动物细胞中以及在小鼠体内的复制能力。另外,发现在2009年爆发的甲型H1N1流感病毒株PB1473位点也是缬氨酸,因此推测这个氨基酸可能贡献了甲流病毒的聚合酶活性。病毒实验证明了这点:将473位点缬氨酸突变为亮氨酸后,突变病毒在哺乳动物中的聚合酶活性以及复制能力均降低,因此这也提示这个位点在2009甲型H1N1流感的高聚合酶活性中起到了作用。进一步的研究发现,PB1473位缬氨酸,598位脯氨酸与PB2627位谷氨酸在某种程度上相关,但关联并不直接。  综上所述,认为禽流感病毒H5N1的聚合酶PB1亚基473位缬氨酸和598位脯氨酸贡献了病毒的聚合酶活性,其中473位点缬氨酸在2009甲型H1N1流感病毒的聚合酶活性起到了关键作用。  
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