【摘 要】
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目的:利用DNA条形码研究贵阳市蚋类幼虫感染索科线虫的情况。 方法:(1)标本来源:选取贵阳市区内十个标本采集点,在七月、八月和九月三个月时间做三次重复采集。(2)标本处理:常规固
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目的:利用DNA条形码研究贵阳市蚋类幼虫感染索科线虫的情况。 方法:(1)标本来源:选取贵阳市区内十个标本采集点,在七月、八月和九月三个月时间做三次重复采集。(2)标本处理:常规固定并形态学鉴定蚋类成熟蛹的种属,获得贵阳蚋类分布的本底资料;体视镜下筛查并分离蚋类幼虫寄生性索虫,描述索虫形态特征。(3)贵阳蚋类DNA条形码参考树的建立:依据形态学分类结果,取不同种群不同种属的蚋类各三个提取DNA,PCR扩增特异性COI基因并测序,用NJ法构建系统发育树,组建贵阳蚋类DNA条形码参考树。(4)索虫的分子鉴定:提取索虫DNA,PCR扩增COI基因和18S rDNA并测序,参照GenBank和BOLD数据库上索虫序列,与实验中所得序列用NJ法共同构建系统发育树,从而鉴定索虫种属。(5)宿主蚋类的鉴定:提取宿主DNA,PCR扩增特异性COI基因并测序,用贵阳蚋类DNA条形码参考树鉴定宿主蚋种属。 结果:贵阳蚋类分布包括蚋属5亚属7种,分别是维蚋亚属、纺蚋亚属、短蚋亚属、蚋亚属和厌蚋亚属。十个采集点中有青岩和大凹两个点的蚋幼虫检出有索虫的寄生,分别检出索虫65条和60条,其中包括112条寄生期索虫和13条寄生后期索虫。通过系统发育分析鉴定,共有两种索虫,一种属于中索属,一种属于胃索属,其宿主分别是五指山蚋和兴义维蚋。 结论:经调查贵阳蚋类幼虫体内有两种索虫寄生,一种是寄生于兴义维蚋的胃索属线虫Gastromermis sp.;另一种是寄生于五指山蚋的中索属线虫 Mesomermis sp.
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