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目的探讨SHR心肌β1-AR表达下调对美托洛尔降压效应的影响。方法1.病毒载体包装及鉴定实验：对本课题组前期成功构建及筛选出的pAAV-ZsGreen-ADRB1-shRNA重组质粒进行酶切及测序鉴定,采用三质粒共转染法进行AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen重组腺相关病毒的包装,并进行病毒纯化、滴度测定及体外感染293细胞活性实验。2.SHR心肌转染实验：将36只SHR随机分为3组：AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen注射组、AAV9-CMV-ADRB1-ZsGreen注射组(阴性对照组)、假手术,每组12只。病毒载体采用心包腔注射法转染SHR心肌,4周后处死大鼠,取心肌组织。采用Real-time RT-PCR法检测各组SHR心肌组织中β1-AR基因mRNA表达；采用免疫组化、Western-blot法检测β1-AR蛋白的表达。3.美托洛尔干预实验：上述3组SHR每组同时随机分为两个亚组,每组6只,分别给予美托洛尔和生理盐水灌胃。每周监测SHR血压水平变化,连续干预4周后比较各组SHR血压变化情况。结果1.病毒载体包装及鉴定：(1)酶切及测序鉴定结果表明前期构建的pAAV-ZsGreen-ADRB1-shRNA重组质粒为正确克隆；(2)病毒滴度测定结果表明纯化后的AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen滴度达1.5x1012vg/mL;(3)病毒载体感染293细胞效率可达95%以上。2.SHR心肌转染的效应：(1) Real-time RT-PCR结果显示,AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen注射后β1-AR mRNA表达明显低于阴性对照组(0.4142±0.3399vs.1.0933±0.5853,P<0.05)；(2)免疫组化结果显示,AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen注射后β1-AR蛋白表达明显低于阴性对照组及假手术组(50.02±4.44vs.80.05±3.72vs.79.30±2.79, P<0.05);(3) Western blot结果显示,AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen注射后β1-AR蛋白表达明显低于阴性对照组(0.5156±0.1199vs.0.8333±0.1728, P<0.05)。3.SHR心肌β1-AR表达下调对血压及美托洛尔疗效的影响：干预4周后,(1) AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen+美托洛尔组、阴性对照+美托洛尔组、假手术+美托洛尔组收缩压明显低于阴性对照+生理盐水组、假手术+生理盐水组(174.8±3.9mmHg vs.168.3±5.3mmHg vs.167.2±5.1mmHg vs.199.4±3.1mmHg vs.198.3±4.5mmHg, P<0.05);(2) AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen+生理盐水组收缩压明显低于假手术+生理盐水组(178.1±6.3mmHg vs.198.3±4.5mmHg, P<0.05);(3) AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen+美托洛尔组收缩压降低幅度明显低于阴性对照组+美托洛尔组和假手术+美托洛尔组(22.84±1.72mmHg vs.28.78±2.72mmHg vs.30.16±5.71mmHg, P<0.05);(4) AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen+美托洛尔组与AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen+生理盐水组降压幅度比较无显著性差异(22.84±1.72mmHg vs.18.84±6.55mmHg, P>0.05)。结论1.成功包装了高纯度、高滴度的AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen病毒载体。2. AAV9-shRNA-ADRB1-ZsGreen病毒转染SHR心肌可显著降低心肌组织中β1-AR表达。3.心肌β1-AR表达下调的SHR其收缩压及对美托洛尔的敏感性均显著降低。