论文部分内容阅读
本研究的目的是培养建立人肺腺癌Anip973/NVB耐药细胞模型并检测其生物学特性。
方法:本研究应用人肺腺癌细胞系Anip973,采用诺维本逐步增加剂量法,诱导建立人肺腺癌耐药细胞模型Anip973/NVB,倒置显微镜观察细胞形态变化;观察该细胞的生长规律;以流式细胞技术检测其细胞周期分布;用MTT法鉴定其对多种抗肿瘤药物的多药耐药性;免疫组织化学检测P-糖蛋白的表达水平。
结果:光镜观察到,Anip973/NVB细胞形态较Anip973细胞不规则。经检测Anip973/NVB细胞的倍增时间与Anip973细胞无明显差异。流式细胞仪测定耐药细胞系Anip973/NVB的细胞主要集中在G0-G1期,为62.90%,S期细胞明显减少,为28.32%;而亲代Anip973细胞上述各周期的百分比分别为53.73%、38.25%。MTT法鉴定Anip973/NVB细胞较Anip973细胞的NVB半数致死浓度(IC50)增大至27.69倍,除此之外,该细胞系对紫杉醇、顺铂、足叶乙甙、氟尿嘧啶等药物也产生了交叉耐药,耐药倍数分别为14.67、12.75、8.29、4.93而对健则仍保持敏感(P<0.05)。免疫组化法检测P-糖蛋白表达,发现Anip973细胞呈弱阳性表达,而Anip973/NVB细胞呈强阳性表达。
结论:Anip973/NVB细胞是一个明确的多药耐药细胞模型,具有耐药细胞的基本生物学特性。对今后从细胞和分子水平研究NSCLC多药耐药机制具有较大的实用价值,也为体外筛选化疗药物,研究耐药逆转等提供了必要的实验材料。