TaHSP70家族发掘及部分成员参与小麦与叶锈菌互作的功能分析

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sw_8818
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
热激蛋白70(heat shock protein70,HSP70)是逆境胁迫下诱导合成的一类功能型蛋白。HSP70遭受逆境胁迫时迅速合成,可稳定蛋白质和生物大分子结构,来提高植株抗逆性。研究表明,植物HSP70在响应逆境胁迫过程中起着重要作用。HSP70多以家族形式存在,在拟南芥、玉米、高粱、谷子、大豆等作物中均有相关的功能报道。然而,小麦中关于HSP70的研究较少。本试验旨在挖掘小麦HSP70基因家族成员,并对参与叶锈菌侵染小麦过程的HSP70成员进行功能分析。  首先,利用生物信息学方法获得25个小麦HSP70基因成员,通过与水稻HSP70蛋白家族成员构建系统进化树,结果显示其中有23个属于HSP70亚家族,2个属于HSP110亚家族。亚细胞定位预测结果显示HSP70亚家族的23个成员中11个基因定位于细胞质,2个定位于内质网,3个定位在叶绿体,7个在线粒体。  接着,选取TacHSP70-1,TacHSP70-2,TacHSP70-5进行表达分析研究,42℃热激0.5h后三者均表达量明显上调,表明小麦HSP70基因能够被高温诱导,符合热激蛋白受高温诱导的基本特性。当小麦分别接种亲和叶锈菌(生理小种165)和不亲和叶锈菌(生理小种260)后,TacHSP70-1,TacHSP70-2,TacHSP70-5三个目的基因表达量均有明显增加,且不亲和组合中基因表达高于亲和组合,表明三者均参与了小麦响应叶锈菌侵染的病理过程。进一步亚细胞定位结果显示三个基因均定位在细胞核和细胞质中,与生物信息学预测的结果相一致,同时揭示了HSP70在细胞中发挥功能的具体部位。  利用VIGS技术分别沉默TacHSP70-1、TacHSP70-2、TacHSP70-5,发现当将目的基因沉默后,在叶片接种叶锈菌后HMC数量增加并且HR面积也有所增加,表明小麦的抵抗能力降低。试验结果说明TaHSP70在小麦叶锈菌的防卫反应中起到正调控的作用。同时构建了RNAi和超表达载体,利用农杆菌侵染小麦幼穗,PCR检测转基因小麦,获得RNAi阳性植株8棵,超表达阳性植株6棵。  综上论文实验结果表明,小麦基因组编码25个HSP70基因成员,其中TacHSP70-1,TacHSP70-2,TacHSP70-5符合热激蛋白受热诱导的基本特性,且作为正向调节因子参与小麦对叶锈菌的防御反应。
其他文献
内生真菌指那些在其生活史中的某一定阶段或全部阶段生活在植物组织内部,对宿主没有造成明显病害症状的真菌。内生真菌在植物组织中普遍存在,并具有丰富的物种多样性。研究表明药用植物内生真菌能产生与宿主植物相同或相似的抗菌、抗癌、抗氧化、抗糖尿病和免疫抑制作用等代谢产物,也可以产生其他新类型化合物,因此,内生真菌成为一类重要的活性物质筛选的微生物资源。姜黄是一种传统药用植物,其内生真菌的研究还未见报道。本研
猪传染性胸膜肺炎(Porcine Contagious pleuropneumonia)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)引起的,属于猪三大呼吸道传染病之一,在世界绝大部分
会议
  中医食疗文化的发展离不开饮食文化的发展和医药文化的发展,是两种文化精华融会贯通的产物。介绍了中医食疗文化的发展历程,中医食疗是我国传统医药学宝库的重要组成部分,中
  了解福州地区医疗机构护理人力资源现状,为政府有关部门制定政策提供依据.方法:采取自制调查表对福州地区30所医院以无记名的方式进行调查.结果:医院平均床护比为1∶0.36,
会议
  暗产属西医学"生化妊娠"范畴,其病名在古代医籍中虽有提及,但中医学发展至今仍未有医家提出明确的诊断标准。何桂医主任参考西医"早孕"及"生化妊娠"的诊断标准并结合多年临
学位
  比较三种治疗方案对普通型手足口病的临床疗效.方法:将200例普通型手足口病患儿分成中医组75例、西医组50例、中西医结合组75例,观察患儿的皮疹消退时间、热退时间及咳嗽、
  回顾评价白内障手术中应用晶状体囊膜孔夹持固定人工晶状体的安全和有效性.方法:26例(27眼)白内障(包括老年性,先天性,外伤性,后发性和人工晶状体雨刷综合征)术中将人工晶
  探讨早期高压氧对脑干损伤患者的临床疗效.方法:回顾性分析2005年1月至2011年7月在我院治疗的脑干损伤患者106例,随机分为两组,病情稳定后1周行高压氧治疗53例(A组)和病情稳