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在非小细胞肺癌(NSCLC)的临床治疗过程中,放射治疗是一种重要的辅助治疗手段,但由于治疗过程中NSCLC耐辐射性的存在,严重影响了 NSCLC病人的治疗疗效和预后情况。因此,寻找到一个新颖有效的放疗增敏剂是目前亟需解决的问题。研究表明,microRNAs(miRNAs)参与了包括辐射增敏在内的许多生物进程。本研究发现,miR-365可以通过调控CDC25A来调节NSCLC细胞的放射敏感性,且miR-365的表达水平与NSCLC细胞的放射敏感性呈正相关。通过MTT和克隆形成实验我们发现,与对照组相比,转染miR-365能够使辐射抵抗的NSCLC细胞A549的放射敏感性明显增加,而转染anti-miR-365则能够使辐射敏感的NSCLC细胞H460的放射敏感性显著降低。为了探讨miR-365提高NSCLC辐射敏感性的机制,我们初步筛选出了 miR-365的下游靶基因CDC25A。报告基因、RT-PCR和Western blot实验结果显示,miR-365可以通过靶向CDC25A的3’UTR来调节其mRNA和蛋白表达水平。此外,我们通过MTT、EdU和克隆形成实验发现,miR-365能够通过下调CDC25A的表达水平进而增强NSCLC细胞A549和H1299的放射敏感性。同时,在体内裸鼠成瘤实验的研究中,我们得出与体外实验一致的结果,即miR-365能够对NSCLC细胞产生显著的辐射增敏作用。综上所述,miR-365能够通过靶向CDC25A进而发挥对NSCLC细胞的辐射增敏作用。本研究结果为miR-365在NSCLC放射治疗中的功能和潜在机制提供了新的见解,同时表明miR-365在NSCLC临床放疗实践中具有可观的应用潜力。目的探讨用siRNA敲降乙肝病毒X蛋白结合蛋白(HBXIP)的表达对宫颈癌ME-180细胞的增殖能力及放射敏感性的影响。方法根据不同的处理方法,分别按两种分组方式进行分组。(1)把宫颈癌ME-180细胞分为4组:空白对照组、4Gyγ射线照射组、HBXIP-siRNA转染组以及HBXIP-siRNA++y射线照射联合组。采用MTT和克隆形成实验法来检测细胞增殖;采用qRT-PCR检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bid的表达;Western blot检测蛋白激酶AKT的磷酸化水平。(2)把宫颈癌ME-180细胞分为3组:空白对照组、HBXIP-siRNA单独处理组、HBXIP-siRNA和AKT共转染组。对3组细胞进行不同剂量的γ射线照射,并采用克隆形成实验方法检测细胞生长。采用Studentt-test对数据进行统计学分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果MTT实验和克隆形成实验结果显示,与γ射线照射组相比,HBXIP-siRNA转染+γ射线照射联合组的宫颈癌ME-180细胞增殖率明显降低(t=11.63、12.17,均P<0.01),并伴随抑凋亡蛋白Bcl-2表达的降低(t=10.88,P<0.01)和促凋亡蛋白Bid表达的增高(t=9.31,P<0.01)。γ射线照射明显上调了 HBXIP蛋白的表达水平和AKT蛋白的磷酸化水平,而转染HBXIP-siRNA则抑制了γ射线照射导致的AKT磷酸化水平的升高。另外,与HBXIP-siRNA单独处理组相比,HBXIP-siRNA和AKT共转染组中HBXIP-siRNA对宫颈癌ME-180细胞增殖的影响显著降低(t=8.96,P<0.01)。结论降低HBXIP蛋白表达可以抑制辐照诱导的AKT磷酸化水平,进而降低宫颈癌ME-180细胞的增殖能力,同时增强其放射敏感性。