论文部分内容阅读
目的 全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)是严重烧伤、创伤的常见并发症,病死率较高,进一步研究SIRS的发病机制及防治措施迫在眉睫。氯喹已有60多年的临床应用历史,是治疗疟疾症状发作的最有效的药物。氯喹还用于治疗一些自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、红斑狼疮等,作用机制可能与其抑制单核/巨噬细胞释放致炎细胞因子如TNF-?、IL-6等有关。本研究旨在明确氯喹对SIRS模型小鼠的保护作用的基础上,研究氯喹拮抗SIRS的作用机制,为氯喹的老药新用提供实验依据。方法 ① 建立小鼠SIRS模型,观察氯喹的保护作用;② 分离人外周血单个核细胞(hPBMC),用细菌DNA、CpG ODN和LPS诱导hPBMC释放TNF-?和IL-6,观察氯喹的抑制作用,并明确其量效、时效关系;ELISA法检测培养上清TNF-?和IL-6的含量;③ 流式细胞术观察氯喹对6-FAM CpG ODN在人单核细胞内聚集的影响,阐明氯喹对细胞内体成熟的抑制作用;④ 电泳迁移率改变分析(EMSA)方法观察氯喹对细胞NF-?B激活的抑制作用。结果 ① 30mg/kg氯喹显著降低细菌DNA、CpG ODN、LPS和灭活大肠杆菌攻击小鼠的死亡率,死亡率由90%降低至50%、85%降低至45%、95%降低至65%以及90%降低至60%;② 氯喹抑制细菌DNA、CpG ODN和LPS诱导hPBMC释放TNF-?和IL-6,呈明显的量效和时效关系;③ 氯喹显著增强6-FAM CpG ODN在单核细胞内的聚集,且该作用无核苷酸序列特异性;④ 氯喹抑制细菌DNA、CpG ODN和LPS诱导的NF-?B的活化。结论 氯喹对SIRS模型小鼠具有显著的保护作用,其作用机制可能与氯喹抑制单核/巨噬细胞的内体成熟,影响CpG DNA的信号转导,从而抑制NF-?B的转录活性,并最终抑制致炎细胞因子的释放有关。