Tenascin与大鼠胚胎心脏发育关系的研究

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目的:检测韧黏素-C(TN-C)和韧黏素-X(TN-X)在不同孕龄大鼠胚胎心脏中的表达规律,探讨其在大鼠胚胎心脏发育过程中的作用。方法:60只雌性SD大鼠,24只雄性SD大鼠,雌雄同笼,以观察到雌鼠排出阴栓为妊娠0.5天(ED0.5),分别于ED11.5、ED12.5、ED13.5、ED15.5、ED17.5、ED19.5、新生1天处死孕鼠或新生鼠,取出心脏或全胚。用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定TN-C和TN-X在各孕龄的胚胎心脏中mRNA的表达水平;免疫组织化学染色法检测上述各孕龄大鼠心脏TN-C和TN-X蛋白的表达;免疫印迹法(Western blot)检测TN-C在大鼠胚胎心脏中的表达水平,进一步验证免疫组化的结果。结果:TN-C mRNA和蛋白在大鼠胚胎心脏发育早期有丰富表达,于ED15.5即显著下调;TN-X mRNA在大鼠胚胎ED12.5开始表达上调,其后各孕龄表达未见明显差异。免疫组化显示,TN-C在ED11.5、ED12.5、ED13.5表达于心脏流出道、前心外膜器官、房室垫和心包腔,而在ED15.5、ED17.5、ED19.5、新生1天相应表达为阴性;TN-X在各孕龄胚胎心脏中均有表达,且随着胎龄增大,表达范围更广泛,于新生1天的大鼠心脏中也广泛表达。结论:TN-C在大鼠胚胎心脏发育早期表达丰富,对心脏的早期发育有一定关系;而TN-X在ED11.5于形成血管的心外膜细胞周围表达,提示TN-X可能与心脏早期冠脉等血管的形成有关。
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