目的:青少年发病的成人型糖尿病(maturity-onset diabetes of the young,MODY)是常染色体显性遗传的单基因型糖尿病,由于MODY亚型的临床及遗传异质性,常易被误诊为T1DM和T2DM。大多数MODY相关基因突变都发生在基因编码区域,可以导致对应的蛋白质功能发生改变,并且干扰胰岛素β细胞代谢内稳态,最终影响MODY患者体液成分的持续变化。我们认为,来自相同家系的MODY患者的蛋白功能变异可能会影响其组织,细胞以及血清蛋白的表达丰度。因此,本研究将通过一个维吾尔族MODY家系,根据iTRAQ结合MRM的蛋白质组学方法,来探寻MODY特异性表达的血清靶标蛋白标记物。方法:本文通过收集先证者的临床资料,纳入一个四代健在的新疆维吾尔族MODY家系,收集具有典型MODY临床特征的先证者血清4例,家系内正常对照血清4例。去除血清高丰度蛋白,用iTRAQ试剂标记消化后肽段,将标记的肽段混合后用强阳离子交换柱和C18柱进行分离,最后用液相色谱串联质谱(1iquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)技术进行质谱鉴定,得到差异表达蛋白。并对差异蛋白质的变化趋势进行分析,使用MRM多反应监测检测技术对候选蛋白在8例样本中进行独立验证,寻找靶标差异表达蛋白作为潜在候选标志物,同时加入T1DM,T2DM以及健康人群的血清,逐一分析这些样本中前期iTRAQ分析所产生的MODY潜在血清标志物的蛋白丰度,从而确定这些标志物是否具备MODY的特异性。结果:质谱数据经过Mascot和PD软件的搜索,以蛋白含量比值对数的绝对值为临界点,对MODY病例和对照进行iTRAQ定量研究,共鉴定到293个蛋白,其中32个为差异表达蛋白,对差异蛋白质的变化趋势进行分析,发现14个持续上调和18个持续下调蛋白质。候选标志物的筛选主要集中在这32个持续上调蛋白质和9个并没有变化趋势但我们比较感兴趣的蛋白质上,包括CATG,LG3BP,POSIN,FIBG,CO6,FA5,MASP2,CD5L和KV110蛋白。并使用MRM检测方法对这41个候选蛋白在8例样本中分别进行筛查验证,最终发现了12个蛋白在验证中呈现明显变化趋势,其中APOC4,SERPINA1,CRP,LPA,C6和F5在MODY病人血清蛋白质中蛋白水平显著高于健康对照组,而另外6个蛋白SERPINA7,CD14,CETP,PZP,SERPIND1,和SHBG则显著低于健康对照组。在靶标生物标志物的确认阶段,加入了10例1型,10例2型糖尿病患者以及10例健康人群的血清进行平行比较。分析这30例样本中12个MODY潜在血清标志物的丰度,从而确定这些标志物是否具备MODY的特异性,研究的策略主要分两步进行,第一步是验证12个蛋白在1型和2型糖尿病病人与健康人群相对比,排除5个特异表达的蛋白(PZP、SHBG、CRP、CETP和SERPIND1),第二步是将剩下7个蛋白在1型和2型糖尿病病人与MODY病人相比,排除两个差异无统计学意义的蛋白(SERPINA1和CD14),综合上述两步骤,最终确定APOC4,LPA,F5,C6和SERPINA7蛋白可以作为MODY血清标志物。结论:五种血清蛋白被鉴定为与MODY密切相关的候选靶标标志物。本次研究为寻找MODY的特异性靶标蛋白质,特别是对于寻找维吾尔族MODY家系的血清生物标志物,开发了新思路、新途径。然而,如何使这些血清差异蛋白能够在临床实践中发挥其潜在的价值。仍然是今后努力的方向,所以还需要更多的维吾尔族MODY家系和深入的研究来进一步探讨这些MODY血清标记物在MODY中的作用,让其真正的应用于临床研究当中。