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研究背景：急性T淋巴细胞白血病是一种恶性血液疾病,由未分化或低分化的淋巴细胞在造血组织中无限增殖所致,多发生于儿童和青少年。新的化疗药物、多药联合的化疗及造血干细胞移植的开展已使急性T淋巴细胞白血病的治疗现状获得很大改善,但难治性和复发性病例仍缺乏有效的治疗方法,而且治疗过程中出现的不良反应也是一个亟待解决的问题。Sam68蛋白是细胞有丝分裂期Src蛋白酪氨酸激酶家族的底物,属于细胞内信号传导与RNA激活蛋白家族STAR (signal transducer and activator of RNA)成员。作为衔接蛋白Sam68可结合多种信号蛋白与RNA,连接信号通路与RNA代谢。近年来,文献报道Sam68在人类多种癌症中异常高表达,干扰Sam68后将会抑制癌细胞的增殖与转移能力,提示Sam68与肿瘤的发生、发展及预后有一定的相关性。本实验室前期实验在鸡B淋巴细胞白血病细胞DT40中,敲除Sam68基因,出现细胞周期阻滞和细胞增殖抑制,但是Sam68与人急性T淋巴细胞白血病关系仍不是很明确。基于这些研究,我们检测Sam68在人类白血病细胞中的表达情况,并初步探讨沉默Sam68后对人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat增殖的影响。目的：研究Sam68基因对人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat增殖的影响,为寻找急性T淋巴细胞白血病新的治疗策略提供理论依据。方法：针对Sam68mRNA531-552靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性真核干扰载体,制备慢病毒并感染Jurkat细胞,强力霉素(Doxycycline)诱导干扰载体表达；用Real-time PCR和Western blot技术验证干扰效率；用改良MTT法检测沉默Sam68基因对Jurkat细胞的细胞活力的影响；用体外细胞集落形成实验观察沉默Sam68基因对细胞集落形成能力的影响;用流式细胞术分析沉默Sam68前后细胞周期的变化。结果：与对照组相比,实验组Sam68基因的表达被有效抑制；沉默Sam68基因降低了Jurkat细胞的活力,抑制了细胞的集落形成能力并且导致S期细胞比例显著增加,G2期细胞比例显著降低(P<0.05)。结论：利用shRNA靶向干扰Sam68基因的表达可以有效抑制人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat的增殖。研究背景：钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ (Calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ, CaMKIⅠ)是钙信号下游的一种多功能丝/苏氨酸蛋白激酶,广泛分布于机体大部分重要组织器官中,调节多种生物学活动。小分子化合物能抑制CaMKⅡ的活性可进而减缓细胞的增殖。人内源性CaMKⅡ抑制蛋白(hCaMKⅡN)是树突状细胞来源的一种功能性新分子,hCaMKⅡN在某些正常和异常的组织细胞中具有一定的表达差异,hCaMKⅡN能抑制肿瘤细胞的增殖和促进肿瘤细胞凋亡,可为临床肿瘤治疗提供一种新的治疗策略。目的：本研究旨在检测人内源性钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白(hCaMKⅡNα和hCaMKⅡNβ)在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和慢性髓细胞白血病(CML)患者骨髓单个核细胞中的表达水平并初步探讨其临床意义。方法：采用实时定量PCR的方法检测hCaMKⅡNα和hCaMKⅡNβ在正常人和AML、ALL以及CML患者骨髓单个核细胞中的相对表达情况。结果：AML、ALL和CML患者骨髓单个核细胞中hCaMKⅡNα和hCaMKⅡNβ的表达均明显低于正常人,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：iCaMKⅡNα和hCaMKⅡNβ可能参与了AML、ALL和CML的发生与发展。