肠道腺病毒41型单克隆抗体制备及鉴定

来源 :第一军医大学 南方医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daliangengbo
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肠道腺病毒(Adenovirus 40,Adenovirus 41,简称Ad40、Ad41)在小儿病毒性腹泻病毒病原中居第二,目前国内该病毒的鉴别检测还没有一个简便、快速的方法.该研究引进了293细胞和国际标准株Ad41,用293细胞培养分离肠道腺病毒,利用冻融法和高速梯度离心纯化病毒抗原,并制成负染色标本和超薄切片标本,进行电镜观察.然后再用Ad41抗原免疫BALB/c小鼠,将该小鼠脾细胞和SP2/0细胞融合,通过对阳性克隆株进行筛选、检测和克隆化等一系列实验,成功地合成了4株抗Ad41杂交瘤,并对该杂交瘤进行了一系列鉴定,在特异性方面,该杂交瘤株产生的抗体只与同型病毒发生阳性反应,与对照组的轮状病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒3、7、21型等病毒无阳性反应.利用酶联免疫吸附试验技术,作者对兰州生物所的7株肠腺病毒分离株进行鉴别,发现全部为Ad41型,与其限制性内切酶图谱分析结果一致.
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