除草剂阿特拉津对鲫鱼的毒性影响研究

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阿特拉津又名莠去津,化学名2-氯-4-乙胺基-6-异丙胺基-1,3,5-三嗪,分子式为C8H14ClN5,是我国目前广泛使用的一种旱地除草剂,其能通过地表径流、淋溶、干/湿沉降等方式进入水体,在直接影响大型水生植物和浮游藻类的同时,给鱼类等水生动物也带来了一定的毒理效应。近年来,因其使用量大、残留期长、水体环境中检出率高和具有内分泌干扰作用等而受到广泛关注。因此,对阿特拉津的水生态安全性评价已迫在眉睫。本硕士论文以鲫鱼为供试生物,研究了除草剂阿特拉津对其的急性毒性,并在此基础上研究了亚急性条件下(0、0.1、0.5、1.0、5.0和10.0 mg·L-1阿特拉津对鲫鱼血清雌二醇含量、外周血红细胞微核率和不同组织器官(肝脏、肾脏、肌肉)中抗氧化酶活性的影响以及其在这些组织器官中的富集趋势。研究结果表明:①阿特拉津对鲫鱼的24h、48h和96h LC50分别为229.33 mg·L-1、146.17 mg·L-1和105.94 mg·L-1,安全浓度为10.59 mg·L-1;按农药毒性分级标准,其对鱼类属低毒性农药。②阿特拉津在鱼体中的富集速度较快,19d即达到富集稳态,但富集能力较低。富集达到平衡时阿特拉津在各组织器官中的最大和最小富集系数分别出现在最低(0.1 mg·L-1)和最高(10.0 mg·L-1)浓度组,在肝脏、肾脏和肌肉中的最大富集系数分别为:13.08、11.00和6.02,最小富集系数分别为:5.22、4.37和2.94。鱼类对阿特拉津的富集能力因水体中污染物浓度不同而有差异,低污染物浓度的富集系数高,高污染物浓度的富集系数低。同时,鱼体不同组织器官对阿特拉津的富集能力也存在差异,表现为:肝脏>肾脏>肌肉。③24d连续暴露后,在低浓度(0.1-5.0mg·L-1)范围内阿特拉津对雄性鲫鱼血清雌二醇的合成产生了诱导作用。当浓度为1.0mg·L-1时,诱导作用最强,与对照组相比血清雌二醇含量增加了84.1%,差异极显著(P<0.01);在高浓度(10.0mg·L-1)下,阿特拉津对雄性鲫鱼血清雌二醇的合成则表现为抑制作用。在以5.0mg·L-1浓度组雄性鲫鱼血清雌二醇含量的变化为考察对象来研究阿特拉津对雄性鲫鱼血清雌二醇含量影响的时间效应时,各个处理时间下的血清雌二醇含量都比对照组的高,其中第14d时雌二醇含量最高,与对照组相比浓度增加了50%,差异极显著(P<0.01)。血清雌二醇含量的变化直接影响到雄性鲫鱼的生殖功能和性征变化。由此推测,体内因富集阿特拉津而导致血清雌二醇浓度发生显著变化的雄性鲫鱼可能会出现一定的生殖缺陷。同时,本试验中血清雌二醇浓度变化的显著性提示可以考虑将其作为一种敏感的分子生物标志物来评价水体中的环境激素污染。④阿特拉津能使鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉抗氧化酶活性产生显著变化。对SOD的研究结果表明:在染毒后24d,各浓度组鲫鱼肝脏SOD活性均受到抑制,肾脏SOD活性则受到诱导,在试验浓度范围内,阿特拉津与肝脏SOD活性之间存在剂量-效应关系,与肾脏SOD活性在1.0-10.0 mg·L-1范围内存在剂量-效应关系;而肌肉SOD活性在低浓度下受抑制,高浓度下被诱导。在14-24d内,阿特拉津与肌肉SOD活性之间存在时间-效应关系,与肝脏和肾脏SOD活性之间在任何时间范围内都不存在显著的时间-效应关系,但在整个试验期内,1.0 mg·L-1和10.0 mg·L-1个暴露浓度对同一器官SOD活性的影响具有相同的变化趋势。对CAT的研究结果表明:染毒后24d,在低浓度(0.1-1.0mg·L-1)范围内,阿特拉津对鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉CAT活性均产生了诱导作用,而高浓度范围内则对这些组织器官CAT活性均产生了抑制作用。从时间效应方面来看,低浓度(1.0 mg·L-1)时,在各个作用时间下,阿特拉津对鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉CAT活性均产生了强烈的诱导作用,且随着暴露时间的延续,诱导作用均先增强后减弱,并最终维持在某一浓度水平仅产生微小波动;在染毒后10d,阿特拉津对鲫鱼肝脏、肾脏和肌肉CAT活性的诱导作用达到最强,最大诱导率分别为93.96%、75.39%和62.86%。高浓度(10.0 mg·L-1)条件下,仅在暴露的第3d阿特拉津对鲫鱼肝脏CAT活性产生了诱导作用,除此之外,在任何时间下,阿特拉津对鲫鱼各组织器官的CAT活性均表现为抑制作用。对GSTs的研究结果表明:24d连续暴露后,阿特拉津对肝脏和肌肉GSTs活性基本表现为诱导作用,最大诱导率分别为110.81%和32.54%,且分别在0.1-5.0 mg·L-1和1.0-10.0 mg·L-1浓度范围内存在剂量-效应关系;与之相反,对肾脏GSTs活性则表现为抑制作用,最大抑制率为14.42%,且在所设浓度范围内均表现出剂量-效应关系。对时间效应的研究表明,当暴露浓度为10.0mg·L-1时,在第6-14d范围内,阿特拉津与肝脏及肌肉GSTs活性之间均存在时间-效应关系;其他任何情况下,任何组织器官在试验期间均不表现出时间-效应关系。⑤在阿特拉津污染胁迫下,鲫鱼外周血红细胞微核率和总核异常率显著升高,并在一定条件下存在剂量-效应和时间-效应关系,说明阿特拉津对水生动物能够产生较强的遗传损伤,且损伤程度随暴露浓度的增加或污染胁迫时间的延长而增强。试验认为除草剂阿特拉津对水生生物具有潜在的致突变作用。本研究显示,阿特拉津对鱼类属于低毒农药,在鱼体中的富集系数较低,但其在低浓度条件下即能引起鱼体产生氧化压力和雄性鲫鱼血清雌二醇含量升高,并对机体表现出一定的遗传损伤。同时,本研究所选指标变化的显著性及其与污染物浓度或作用时间之间所存在的剂量-效应或时间-效应关系,说明其有望成为评价水体中阿特拉津污染的生物标志物。
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