【摘 要】
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本研究用犊牛睾丸细胞及MDBK细胞从我国内蒙古自治区达拉特旗发病的进口小尾寒羊唇病理痂块中分离到一株病毒,并对其进行连续传代至病变稳定。对该分离株进行了培养特性研究
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本研究用犊牛睾丸细胞及MDBK细胞从我国内蒙古自治区达拉特旗发病的进口小尾寒羊唇病理痂块中分离到一株病毒,并对其进行连续传代至病变稳定。对该分离株进行了培养特性研究、电镜观察、病毒核酸类型鉴定试验、脂溶剂敏感试验、胰蛋白酶试验、耐酸性试验、耐热性试验、紫外线照射试验、反复冻融试验、甲醛灭活试验、动物回归试验及PCR检测,鉴定该分离株为羊传染性脓疱病毒,并充分掌握了分离病毒的理化生物学特性。根据已发表的羊传染性脓疱病毒基因序列,应用Oligo4.1程序设计一对特异性引物,进行PCR扩增及最佳条件的优化筛选,结果表明PCR反应的最佳条件为:变性温度为94℃,退火温度为55℃,循环次数为35次。应用该PCR扩增体系可扩增出羊传染性脓疱病毒的429bp特异性片段,与理论设计的扩增目的片段大小相符,用该PCR扩增体系对口蹄疫(FMDV)、MDBK细胞进行扩增,未出现该特异性片段,说明该PCR扩增体系具有良好的特异性;该PCR扩增体系可检测出0.5ng模板,说明该PCR扩增体系具有很高的敏感性,。
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