胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase，TP）是嘧啶核苷合成和分解过程中的一个关键酶。目前学界的研究认为TP与血小板源性内皮细胞生长因子（platelet-derived endothelial cell growth factor，PD-ECGF）具有同源性，其诱导血管形成和抗凋亡的作用与结直肠肿瘤的生长、转移能力密切相关。同时TP也是使5'-脱氧氟尿苷（5’-deoxy-5-fluorouridine，5'-DFUR）、卡培他滨（capecitabine， CAP）等5-FU前体药物转化为5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU），干扰细胞DNA的合成、发挥抗肿瘤作用的关键酶，其活性与结直肠癌细胞对氟尿嘧啶前体类药物的敏感性及靶向治疗密切相关。因此TP在结直肠肿瘤的发生、发展和预后有着双重作用。　　大量临床研究证实，在肿瘤组织中TP的活性明显高于周围的正常组织，但在不同的肿瘤组织中，TP表达的具体部位、活性却不尽相同。关于结直肠癌及转移组织中表达TP的具体部位报道各异。我们前期研究发现在人结直肠癌组织中，TP蛋白主要由间质细胞表达，尤其是肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophage，TAM），而非肿瘤细胞本身。近年来的研究表明干扰素-α2a（interferon-α2a，IFN-α2a）可上调人结肠癌细胞LOVO和LS174T中TP的mRNA表达水平。提示临床上可通过应用这些细胞因子增强5'-DFUR的化疗效果。　　5-FU是临床上用于消化道恶性肿瘤化疗的主要药物，但因有严重的副作用而使其临床应用受到一定的限制。近年被其前体药物如5'-DFUR、卡培他滨等逐渐代替，这些前体药物本身无细胞毒性作用，只有在肿瘤组织中被关键酶TP转化为5-FU后才能对细胞产生毒性作用。这样既有效的抑制了肿瘤的生长，又消除了潜在的血管生长因子，实现了抗肿瘤生长与抗肿瘤血管生成的统一。因此提高肿瘤组织内TP的表达有利于提高此类药物的抗肿瘤效应，我们前期研究发现在体外实验中，将TP基因通过慢病毒转染进结肠癌细胞后，显著提高了5'-DFUR对LOVO、HT29、LS174T细胞株的抑制效果，联用干扰素-α2a可以使LOVO细胞转化5'-DFUR为5-FU的能力进一步增强，提高5'-DFUR对该肿瘤细胞的抑制作用。　　本实验我们采用慢病毒为载体将TP基因转入结直肠癌LS174T细胞株中，然后接种于裸鼠背部制作裸鼠结肠癌模型，利用5'-DFUR、5-FU联合干扰素α2a对转染TP前后裸鼠结肠癌模型进行治疗，最后处死裸鼠、留取肿瘤标本做石蜡切片免疫组织化学染色，观察转染TP基因前后肿瘤组织内TP、VEGF、CD34表达的不同。　　目的:　　探索在转染TP基因的裸鼠结直肠癌肿瘤模型中，干扰素-α2a对TP表达、微血管生成，及对5`-DFUR与5-FU抗肿瘤作用方面的影响。　　方法:　　以慢病毒为载体将TP基因转染至结肠癌细胞株LS174T，得到稳定的TP高表达细胞株LS174T-TP，并传5代后在流式细胞仪上检测其转染率。将96只BALB/c裸鼠分成2组，每组48只，分别应用野生型、及转染TP基因后的LS174T-TP细胞株接种裸鼠背部皮下，分别制作裸鼠结肠癌TP低、高表达模型。每组再随机分为6小组，分别应用（1）生理盐水（对照）、（2）干扰素-α2a、（3）5-FU、（4）5-FU+干扰素-α2a、（5）5’-DFUR、（6）5’-DFUR+干扰素-α2a，进行干预，连续用药5天，并对裸鼠体重进行测量、记录，观察其状态。2周后处死各组裸鼠，分离皮下肿瘤称重后，用福尔马林液固定、石蜡包埋、切片后分别应用鼠抗人CD34、VEGF和抗PD-ECGF单克隆抗体对肿瘤进行免疫组织化学染色，统计其肿瘤组织内TP表达、VEGF、肿瘤微血管密度（microvesseldensity,MVD）在不同处理组之间的差异。　　结果:　　以慢病毒为载体将TP转染进LS174T细胞株后，传5代后、各代转染率均在95％以上。所有接种结肠癌细胞的裸鼠均成功建立模型，且在实验过程中无中途死亡个体。5天给药结束后，相比各自对照组，两种裸鼠模型中，5-FU组与5-FU+干扰素α组裸鼠体重明显减少，差异均有统计学意义（P<0.05）；5’-DFUR组与5’-DFUR+干扰素α组体重也有轻度降低，但差异无统计学意义。在野生型LS174T裸鼠荷瘤模型中，使用抗肿瘤药的3~6组肿瘤重量与对照组相比均明显降低，抑癌率分别为48%、27%、48%、57%，差异具有统计学意义（P<0.05）。其中5'-DFUR组（48%）与5'-DFUR+干扰素α组（57%）、5-FU+干扰素α组与5'-DFUR+干扰素α组（27%与57%）比较抑癌效率，差异具有统计学意义（P<0.05）。5-FU组与5-FU+干扰素α组对比，抑癌效率之间无统计学差异（P>0.05），在LS174T-TP细胞株裸鼠模型中，5'-DFUR组、5'-DFUR+干扰素α组抑癌率分别为27%、48%，差异具有统计学意义（P<0.05）；5'-DFUR组与5-FU组、5'-DFUR+干扰素α组与5-FU+干扰素α组之间对比，5'-DFUR治疗效果更好（27%、48%VS7%、3%），且差异之间有统计学意义（P<0.05）。而使用5-FU的两组未显示出良好的抗肿瘤效果（7%、3%）。免疫组织化学染色结果显示转染TP基因后，裸鼠肿瘤组织中TP的表达上升，微血管密度增加。而使用干扰素-α2a后肿瘤组织中的TP表达、MVD差异无统计学意义。　　结论:　　转染TP基因后,LS174T细胞株裸鼠模型的TP表达显著增强，有效提高了5'-DFUR的治疗效果，而联用干扰素-α2a能使5’-DFUR的抗肿瘤效果进一步增加。转染TP基因或联用干扰素-α2a对5-FU的抗肿瘤效果无明显增强作用。