TSP-1、SuFu、GLI1在涎腺黏液表皮样癌中的表达及在Hedgehog通路中作用的探讨

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目的:1.探讨血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)及Hedgehog信号通路(hedgehog signaling pathway,Hh)Fu抑制子(SuFu)、胶质瘤相关癌基因家族锌指转录因子1(GLI1)在涎腺黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)中表达及临床意义;2.探索TSP-1对黏液表皮样癌Hh信号通路关键基因SuFu、GLI1的潜在影响。方法:1.选取2010-2019年遂宁市中心医院口腔颌面外科手术切除的涎腺MEC组织石蜡切块52例和正常涎腺组织10例,分为实验组(黏液表皮样癌52例)和对照组(正常涎腺10例)。通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色复查病理结果;通过免疫组织化学染色法检测MEC和正常涎腺组织标本中SuFu、GLI1、TSP-1蛋白表达情况,并分析三者与MEC组织临床、影像及病理特征之间的关系;2.选取黏液表皮样癌MC-3细胞系(空军军医大学口腔生物学教研室建立并提供)作为研究对象,将细胞分为空白对照组、TSP-1作用组、TSP-1+CD36阻断组,通过免疫荧光检测、荧光光密度值测定(Image J软件)分析等方法探究TSP-1在黏液表皮样癌细胞分化增殖过程中对Hh通路关键基因SuFu、GLI1的蛋白表达影响;3.计数资料采用卡方检验、Fisher确切概率法;计量资料采用均数±标准差表示,多组之间的比较采用多样本均数的单因素方差分析,两组之间的比较采用独立样本的t检验;P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1.MEC组TSP-1、SuFu、GLI1蛋白阳性表达率为63.5%(33/52)、51.9%(27/52)、57.7%(30/52),正常涎腺组TSP-1、SuFu、GLI1蛋白阳性表达率均为10%(1/10),实验组与对照组蛋白阳性表达率差异具有统计学意义(P<0.05);2.TSP-1在高、中、低分化MEC中的阳性表达率依次降低,在高、低分化MEC中蛋白表达率的差异具有统计学意义(P<0.05);SuFu在高、中、低分化MEC中的阳性表达率呈依次升高,在高、低分化MEC中蛋白表达率的差异具有统计学意义(P<0.05);同时,GLI1在高、中、低分化MEC中的阳性表达率也依次明显的增高,在高、低分化MEC中蛋白表达率差异具有统计学意义(P<0.05);3.TSP-1蛋白的表达水平与MEC肿瘤CT(computed tomography,CT)直径差异和颈部淋巴结转移与否有密切关系(P<0.05),而与吸烟、饮酒、年龄、部位、临床分期、临床直径、原复发等临床特征无密切关系(P>0.05);SuFu蛋白的表达水平与MEC肿瘤CT直径差异、颈部淋巴结转移与否等临床特征有密切关系(P<0.05),而与吸烟、饮酒、年龄、部位、临床分期、临床直径等无关(P>0.05);GLI1的表达水平与MEC肿瘤CT直径差异和颈部淋巴结转移与否有密切关系(P<0.05),而与吸烟、饮酒、年龄、部位、临床分期、临床直径、原复发等因素无关(P>0.05);4.空白对照组中GLI1、SuFu蛋白表达的平均光密度值最高,TSP-1蛋白作用组平均光密度值最低,TSP-1+CD36阻断组平均光密度值介于两者之间,三组间SuFu、GLI1蛋白的平均光密度值差异具有统计学意义(P<0.05);TSP-1作用组与空白对照组蛋白表达差异具有统计学意义(P<0.05),TSP-1作用组与TSP-1+CD36阻断组蛋白表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在MEC中,TSP-1蛋白可能通过受体CD36抑制SuFu、GLI1的蛋白表达来影响Hh信号通路的异常活化强度,进而抑制MEC的发生发展,而TSP-1蛋白通过与CD36受体结合,影响SuFu和GLI1的上游Hh信号通路启动配体SHH的表达活性可能是抑制MEC的关键所在,但具体机制还有待于进一步研究。
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