目的:近年来2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）患病率急剧增加,糖尿病外周动脉疾病是其主要的血管并发症之一,促进缺血后血管新生可以显著改善患者症状,但目前尚无有效的治疗手段。越来越多的研究显示低强度连续治疗性超声波（therapeutic ultrasound,TUS）可以修复受损组织,加速缺血组织的再血管化,但是否可以改善T2DM患者的缺血症状,目前尚无报道。本研究旨在观察低强度连续TUS对T2DM小鼠下肢缺血后血管新生及高糖条件下人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）功能的影响,并探讨其可能的分子生物学机制,为T2DM血管并发症的治疗提供新视角。方法:1.低强度连续TUS对T2DM小鼠缺血下肢血管新生的作用:高脂饲料（8周）联合链脲菌素（单次腹腔注射,100mg/kg）构建T2DM小鼠模型;单侧股动脉结扎构建下肢缺血模型后,根据分组给予或不给予低强度连续TUS（1MHz,0.3W/cm2,9min/day,连续14天）治疗,红外热成像仪检测下肢血流,下肢缺血分数按照缺血评分标准评定,免疫组织化学染色检测组织毛细血管密度,免疫荧光染色检测组织内皮凋亡及氧化应激水平,Real-time PCR检测组织线粒体功能,Western Blot检测组织中Akt、p-Akt、e NOS、p-e NOS、VEGF、Bcl-2、Bax、AIF、Cytochrome c、Caspase3、c-Caspase3蛋白表达。2.低强度连续TUS对高糖条件下内皮细胞血管新生功能的影响:采用Western Blot检测细胞中Akt、p-Akt、e NOS、p-e NOS及VEGF蛋白表达,CCK-8实验、Transwell实验及Matrigel小管生成实验分别检测细胞的增殖活性、细胞迁移及小管生成能力。3.低强度连续TUS对高糖条件下内皮细胞凋亡的影响:TUNEL法检测细胞的凋亡,DCHF-DA活性氧试剂盒检测细胞内ROS水平,Mito SOX试剂盒检测线粒体ROS水平,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,Western Blot检测细胞Bcl-2、Bax、AIF、Cytochrome c、Caspase3、c-Caspase3蛋白表达。结果:1.低强度连续TUS能促进T2DM小鼠缺血下肢血管新生:与正常血糖小鼠相比,糖尿病小鼠下肢缺血评分增高,血流灌注降低,毛细血管密度减少,内皮凋亡增多,氧化应激水平升高,线粒体功能受损,促血管新生因子表达降低,凋亡蛋白表达增多,抗凋亡蛋白表达降低。低强度连续TUS治疗不仅可以逆转糖尿病的毒性作用,还可以改善正常血糖组的各项指标。2.低强度连续TUS通过修复PI3K-Akt-e NOS通路改善高糖条件下内皮细胞血管新生能力:与正常组相比,高糖可以损伤内皮PI3K-Akt-e NOS通路,而低强度连续TUS可以修复该通路,并提高下游VEGF的表达,改善细胞的增殖、迁移及小管生成功能,L-NAME或LY294002可以部分抑制低强度连续TUS的保护作用。3.低强度连续TUS通过改善线粒体功能抑制高糖诱导的内皮细胞的凋亡:与正常组相比,高糖可以诱导内皮细胞凋亡、上调凋亡蛋白水平、抑制抗凋亡蛋白表达,提高细胞内ROS及线粒体ROS的水平,降低线粒体膜电位,低强度连续TUS不仅可以修复高糖的损伤作用,还可以改善正常组的各项指标。结论:低强度连续TUS可以促进T2DM小鼠缺血下肢血管新生及血流灌注;机制可能与内皮PI3K-Akt-e NOS信号通路修复、线粒体功能改善密切相关。