miR-21与p57kip2在雄激素依赖性前列腺癌中表达及其关系的研究

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目的为阐明miR-21基因异常与人前列腺癌发生发展的关系,本文拟检测miR-21与p57kip2和蛋白表达的调控关系,探讨miR-21对前列腺癌中p57kip2表达的调控作用,并为前列腺癌的发病机制和诊断治疗的研究提供新的思路。方法选取收集25例前列腺癌手术标本及5例增生组织标本采用SYBRGreenI实时荧光定量PCR技术检测miR-21的表达。相同的方法检测了p57kip2mRNA的转录水平,并采用原位杂交技术进一步验证p57kip2的表达和细胞定位。采用免疫组化技术检测p57kip2蛋白的表达。对miR-21与p57kip2mRNA和蛋白表达的关系进行分析。结果1、qPCR结果:miR-21在前列腺癌组织中的表达上调3倍以上,上调幅度明显高于增生组,差异有统计学意义。并且低分化癌中的表达显著高于高分化癌。p57kip2mRNA在前列腺癌及增生组织中的表达率分别为68%和60%,与增生的前列腺组织相比,在有表达的样本中前列腺癌转录水平下调率明显增多,其中低分化组的p57kip2mRNA转录水平明显下调。对miR-21与p57kip2mRNA进行spearman相关性分析,提示二者的转录水平大多无统计学相关关系。2、免疫组化结果:p57kip2mRNA在增生组织中未见表达,前列腺癌中的表达阳性率为68%,前列腺癌组与增生组表达有统计学意义。在不同分化程度的前列腺癌中p57kip2表达有统计学意义,前列腺癌低分化组中的表达明显降低(P=0.035<0.05)。3.原位分子杂交检测结果:p57kip2mRNA在增生组织中未见表达,前列腺癌中的表达阳性率为55%,在不同分化程度的前列腺癌组织中的表达分别为高分化(75%),中分化(38%),低分化(0%)。前列腺癌组与增生组表达有统计学意义。相关性分析:前列腺癌组原位杂交表达情况与qPCR结果明显正相关(r=0.495, P=0.001)。4、相关性分析:spearman相关性分析p57kip2与miR-21二者的表达:前列腺癌组的相关系数r=-0.567, P=0.006<0.01,提示前列腺癌中miR-21抑制p57kip2蛋白的表达水平,二者负相关关系。结论1、p57kip2mRNA和蛋白在前列腺癌中表达异常,p57kip2的变化方式与抑癌基因的作用方式相似。2、miR-21未见上调或下调p57kip2mRNA的作用。可能仅抑制p57kip2的进一步翻译但不能将其根本降解,而蛋白水平在前列腺癌中明显下降,肿瘤细胞可能通过miR-21介导的p57kip2转录后基因沉默获得浸润转移能力。3、miR-21在前列腺癌组织表达明显上调,并且抑制p57kip2蛋白的合成,起到负性调控p57kip2蛋白的作用。4、miR-21差异表达状况可为前列腺癌早期筛查、病理分期、指导治疗、复发检测提供临床应用价值。
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