论文部分内容阅读
目的：研究HMGA1对甲状腺癌SW579细胞Snail表达的影响，并对其作用机制进行初步探讨，为揭示HMGA1相关的Snail的发生机制提供一种新的思路。方法：用免疫组化的方法检测HMGA1抗体在组织组合芯片上的表达，并对HMGA1与甲状腺癌组织的临床参数相关性进行分析。采用RT-PCR、Western-blot技术检测SW579细胞中HMGA1沉默后Snail在mRNA与蛋白水平的表达；将构建成功的Snail基因的启动子虫荧光素酶报告质粒与HMGA1表达质粒共转染SW579细胞，利用双荧光素酶报告系统，检测HMGA1对Snail启动子活性的影响。结果：1.组织芯片结果显示：HMGA1在甲状腺癌组织中表达明显高于正常甲状腺组织，有统计学意义(P<0.05)。在甲状腺癌组织中，HMGA1在女性甲状腺癌患者的阳性表达率显著高于男性甲状腺癌患者，有统计学意义(P<0.05)；HMGA1的表达与病理分型有相关性，在甲状腺乳头状癌中的表达显著高于滤泡状癌和未分化癌，有统计学意义(P<0.05)。HMGA1的表达与患者的年龄和有无淋巴结转移无关(P﹥0.05)；2.甲状腺癌SW579细胞瞬时转染HMGA1siRNA序列48h后，RT-PCR、Westernblot结果显示HMGA1siRNA组与细胞对照组比较，HMGA1、Snail在mRNA及蛋白水平的表达均降低；3.成功构建了Snail启动子的荧光素酶报告质粒，证明了该启动子有明显活性。将Snail启动子的荧光素酶报告质粒与HMGA1表达质粒共转染SW579细胞时，发现HMGA1能提高Snail启动子活性（HMGA1表达质粒组和空载体组相比，P<0.05）。结论：1. HMGA1在甲状腺癌组织中表达显著高于正常甲状腺组织，HMGA1的异常表达与患者性别及甲状腺癌病理分型有关。2.在甲状腺癌SW579细胞中HMGA1可通过激活Snail基因启动子活性促进Snail的表达。