论文部分内容阅读
随着人们生活水平不断提高,糖尿病发病率上升及患者低龄化的现象日趋明显,糖尿病正在成为影响人们健康和生活质量的重要社会问题之一。目前降糖药物已有多种,其中α-糖苷酶抑制剂降糖药通过抑制α-糖苷酶的活性,减少多糖的水解达到降低血糖之目的。开发糖苷酶抑制剂类降糖药是抗糖尿病药物研究的热点之一。抑制剂对酶活性的抑制作用及其构效关系是糖苷酶抑制剂研究的关键,因此研究建立简便、快捷、灵敏的糖苷酶活性测定方法,成为研究的首要任务。本文在认真总结近年来糖苷酶抑制剂研究的基础上,建立了糖苷酶活性测定方法,对测定的最佳条件(如pH和温度)进行了研究,并测定了本实验室设计合成的新型糖苷衍生物对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明：化合物3(c=2.65 mmol/L, IC=32.05%)、7(c=2.62 mmol/L, IC=24.95%)、8(c=2.62 mmol/L, IC=27.66%)、9(c=2.62 mmol/L, IC=28.81%)对α-淀粉酶抑制活性相对较好,但低于对照品Acarbose的抑制活性。化合物13(c=2.90 mmol/L, IC=35.9%)、14(c=2.90 mmol/L, IC= 42.16%)对β-葡萄糖苷酶抑制率较好,已合成化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用都不太理想。另外,本文采用HPLC法,利用示差折光检测器,探讨了阿卡波糖原料药含量测定方法。以Agela Venusil XBP NH2柱,以V(乙腈)：V(磷酸盐缓冲液)=65：35作为流动相,在流速1.0 mL/min,柱温35℃条件下,对阿卡波糖的线性范围是0.396～4.752mg/mL (r=0.9999),平均回收率100.11%,RSD=0.93%。提出了一种测定阿卡波糖原料药含量的操作简便、速度快、结果准确的测定方法。最后,硅胶作为载体,研究了α-淀粉酶的固定化及最佳固定化条件,如硅胶目数(500～800)、戊二醛浓度(2%)、pH值(7)、反应温度(4℃)等。并对利用固定化酶色谱柱模型筛选α-淀粉酶抑制剂的可行性进行了初步探索。