体液如血浆(或血清)和脑脊液可以在疾病发生和发展的整个过程中随时抽取出来进行分析和研究,因而是临床疾病的重要研究对象.在作者的工作中,作者以精神分裂症患者和正常对照的两种体液蛋白即脑脊液蛋白和血清蛋白为样品,采用双向电泳技术分别制作了二维凝胶以寻找表达上有差异的蛋白,并通过质谱技术进行了蛋白的鉴定.这部分工作共分析了46个中国精神分裂症患者、35个中国正常人、数个欧洲正常人的脑脊液样品以及36个服用氯氮平、36个服用氯丙嗪的中国精神分裂症患者和41个中国正常人的血清样品.为了了解样品中的蛋白组成,作者首先制作了一张脑脊液蛋白的二维凝胶表达图谱和一张血浆蛋白的二维凝胶表达图谱.实验共鉴定了53种脑脊液蛋白,它们主要由白蛋白、抗体、载脂蛋白、补体蛋白、肌动蛋白、珠蛋白、纤维蛋白等组成.大部分的脑脊液蛋白来自于血浆,只有三种蛋白即淀粉样蛋白-1(APP1)、激肽释放酶-6(KLK6)和蛋白激酶C结合蛋白-2(NEL2)具有特殊的中枢神经系统功能.另外发现四种蛋白即血管紧张肽原(ANGT)、补体蛋白C3(CO3)、骨髓细胞-富亮氨酸糖蛋白(CD14)和β-痕量蛋白(PGHD)具有神经传导功能.在原始血浆中,作者共鉴定了70种蛋白.比较精神分裂症患者和正常人的脑脊液、血清的蛋白表达情况后发现了两种在表达水平上有显著差异的蛋白:一种是脑脊液载脂蛋白A-IV(APA4),在精神分裂症患者中的表达水平较正常人明显偏低(P<0.03);另一种是血清珠蛋白(HTP),在精神分裂症患者中的表达水平较正常人明显偏高(P<0.001).二维凝胶电泳虽然是一种高效的方法却存在着一定的"偏见",一些低丰度蛋白、膜蛋白、极端酸碱性蛋白或极端高低分子量蛋白无法在胶上有比较好的表达效果.血浆蛋白质组即是人类蛋白质组,血浆蛋白尤其是低丰度蛋白可能在代谢过程中起重要的作用,因而血浆蛋白的研究将具有重要的意义.为了鉴定更多的血浆蛋白,原始血浆样品制备方法的探究以蛋白的分级分离为切入点,采取了两种策略即系列亲和色谱层析法以及疏水色谱层析法.系列亲和色谱层析法分别以Mimetic Blue和Protein G层析作为第一、第二级层析、以凝集素层析作为第三级层析,按照蛋白携带的糖链种类与结构对已去除了白蛋白和免疫球蛋白的剩余血浆样品进行分级分离.样品通过分级分离不仅降低了复杂度,而且还从中获取了许多蛋白的结构与功能信息,这部分的工作也为进一步研究糖蛋白奠定了基础.实验中还试用了三种疏水层析柱即Phenyl、Butyl以及Octyl疏水性色谱层析柱对原始血浆蛋白进行分级分离.