复合型絮凝剂的絮凝特性研究

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微生物絮凝剂是微生物在生长过程中分泌的一类具有絮凝活性的高分子聚合物。与传统的高分子絮凝剂相比,微生物絮凝剂具有无毒、易于生物降解、对环境无污染等优点。随着人们环保意识的增强,微生物絮凝剂正成为国内外研究开发的热点。本研究利用实验室筛选出的四株絮凝菌DG2、DN1、H8、H13构建出比单一菌株更高效稳定的复合絮凝菌,对高岭土的絮凝率达到95%,且在较低温度下(10~20℃)絮凝效果稳定。对菌株DG2、DN1、H8、H13进行了形态观察、生理生化鉴定及16SrDNA序列分析鉴定,鉴定结果为H8与假单胞菌(Pseudomonas mandelii)亲源关系最近;H13与嗜气杆菌(Bacillus aerophilus)亲源关系最近;DN1为动胶菌属(Zooglea sp.);DG2为草莓假单胞菌(Pseudomonas fragi)。分别采用MPN法和CFU法对复合菌的菌群结构分析,结果表明,复合菌连续传代培养13次后菌群结构达到稳定,不同生长时期DG2、DN1、H8、H13的菌群分布情况不变,菌群数量由多到少依次为DG2≥DN1>H8>H13;DG2、DN1、H8、H13的菌群数量均在培养48h后达到最大值,分别为109cfu·mL-1、109cfu·mL-1、108cfu·mL-1、106cfu·mL-1。为了提高絮凝活性,对复合絮凝菌进行最佳絮凝条件优化。优化结果表明最佳絮凝条件是:高岭土pH值为6.0,菌液投加量为4%,静沉时间为5min,加入CaCl2可以提高絮凝性,CaCl2最佳加入量为0.05%。通过絮凝分布实验确定了有效的絮凝物质主要分布在发酵液的上清中,对上清液的絮凝剂采用乙醇沉淀法进行提取,并对提取工艺进行优化。结果表明最佳提取工艺为:发酵液超声波100HZ处理10min后6000r/min离心10min,向上清液中加入1.5倍预冷无水乙醇,4℃静置提取24h,将提取液6000r/min离心15min,收集沉淀,60℃干燥24h。每升发酵液可获得0.9073克絮凝剂,对的高岭土悬液的最小投加量为0.016g·L-1。对絮凝剂进行定性定量分析,确定此絮凝剂主要含有糖、蛋白质、氨基糖和葡萄糖醛酸,其中糖占总物质25.5%,蛋白质占23.4%,氨基糖为1.58%,葡萄糖醛酸为6.39%。
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