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二十世纪末,Kubo等指出药物对不同状态的TYR影响也是不同的.要研究药物对TYR活性的影响,应观察药物对不同状态TYR的影响.为此,我们建立了蘑菇TYR多巴速率氧化法,并运用这一检测方法研究分析了5-MOP等中药单体对静息态(met)、活化态(oxy)蘑菇TYR的影响.MC、KC、FC是皮肤细胞的主要组成成分,它们具有不同的生物学功能,相互间又具有紧密不可分隔的联系和作用.它们的形态、结构和功能等变化都会引起皮肤发生相应的改变,所以体外培养MC、KC、FC已成为研究皮肤病病因、发病机理、药物作用机理的模型.我们吸取国内外和该实验室的经验,成功地建立了用同一皮肤标本同时培养MC、KC、FC的技术方法.并在此基础上,参考5-MOP等四种中药单体对不同状态蘑菇TYR的作用结果,研究分析了这四种中药单体对体外培养的MC的TYR活性和细胞增殖的影响.现将工作情况归纳如下:一、用同一皮肤标本同时培养、纯化人表皮正常MC、KC和FC;二、5-MOP、8-MOP、山柰素和芍药甙等中药单体对静息态(met)和活化态(oxy)蘑菇TYR活性的影响.为了深入探讨药物对不同状态TYR的作用和作用的靶点,我们建立运用了蘑菇TYR多巴速率氧化法,观测了5-MOP等四种中药单体对oxy-TYR和met-TYR活性的影响.三、5-MOP等对人正常黑素细胞的TYR活性和增殖的影响.在初步观察5-MOP等四种中药单体对蘑菇TYR活性影响的基础上,我们运用多巴氧化酶活性测定方法,进一步研究了5-MOP、山柰素对MC的TYR活性的影响.并运用MTT法观察了5-MOP、8-MOP、山柰素和芍药甙对MC增殖的影响.