细胞程序性死亡是细胞的一种基本生物学现象,由基因控制,自主而有序地发生。多细胞生物通过细胞程序性死亡的途径去除不需要的或异常的细胞。细胞程序性死亡有多种不同方式,细胞程序性坏死是其中之一。细胞程序性坏死由肿瘤坏死因子受体家族以及Toll-like受体家族启动,RIP1与RIP3是已知的通过相互作用传递死亡信号的蛋白激酶,RIP3是具有决定性作用的使细胞程序性坏死与其他有RIP1参与的信号通路相区分的转折关键性蛋白,而假激酶MLKL是RIP3的特异性底物蛋白。MLKL被RIP3磷酸化之后,由单体游离状态转变为低聚体状态,低聚化的MLKL可以结合磷酸肌醇和心肌磷脂,从而由细胞质转移到细胞质膜以及细胞器膜上,在膜结构中形成通透性孔道,破坏膜的完整性,导致细胞死亡。在细胞水平的实验中,对可发生细胞程序性坏死的细胞过表达MLKL的上游激酶RIP3,RIP3的过表达导致自激活而具备了磷酸化MLKL的活性,MLKL即被激活,此时细胞不依赖于受体的启动而直接发生细胞程序性坏死。MLKL作为直接破坏细胞膜系统的死亡执行者,我们猜测它可能不仅仅参与了细胞程序性坏死,还可能同时是其他死亡信号通路的执行者。若如猜想,在内源表达MLKL的细胞中过表达某一未知细胞程序性死亡信号通路的关键蛋白激活了该信号通路,MLKL位于下游被激活而执行了类似的细胞致死功能,就会观察到细胞死亡的现象,并且,当该细胞的内源MLKL不表达时,由于该信号通路缺少了下游的死亡执行者,则观察不到细胞死亡。因此,我们设计了实验在具有内源表达MLKL而不表达MLKL的上游磷酸化激酶RIP3的Hela细胞上对全部已知的人类的蛋白激酶进行筛选,企图找到参与依赖于MLKL的细胞程序性死亡的上游激酶。