目的：通过检测苦参乌梅汤对HepG2.2.15细胞中核转录因子(NF-κB)、促炎性细胞因子(IL-18、IL-2、IL-6、IFN-γ和TNF-α)、趋化因子(CCL20)以及JAK-STAT信号通路部分信号因子(STAT1、STAT2、ISGF3、OAS和PKR)的mRNA表达水平的影响,探讨其抗HBV的作用机制。方法：1.细胞培养：将冻存的HepG2.2.15细胞混悬液移入离心管,加入5ml的培养液A,轻轻摇均匀,然后置入离心机1000rpm离心5min,去除上层液。然后接种在含有培养液A的培养皿中继续培养,当观察HepG2.2.15细胞融合至85%-90%时,再以0.25%的胰蛋白酶进行消化传代(1：2),每2-3天更换一次培养液A,每周用培养液C对培养的细胞进行一次筛选,以确保HepG2.2.15细胞株的稳定性。2.药品配制与分组：将浓度为1.0×106/L的HepG2.2.15细胞悬液接种于6孔板,分为空白对照组(培养液),阳性对照组(恩替卡韦,0.1mg/mL),苦参乌梅汤低、中、高剂量组(0.156mg/ml、0.625mg/ml、2.50mg/ml)共5个实验组,每组3个复孔,每孔200 μ L,每24h换液1次,96h时收集细胞,-80℃冻存,待测。3.根据互联网生物信息资源辅助设计引物序列,Trizol一步法提取细胞总RNA,利用逆转录酶反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增,检测细胞内核转录因子(NF-κB)、促炎性细胞因子(IL-18、IL-2、IL-6、 IFN-γ和TNF-α)、趋化因子(CCL20)以及JAK-STAT信号通路部分信号因子(STAT1、STAT2、ISGF3、OAS和PKR)的mRNA表达水平。结果：1.苦参乌梅汤对HepG2.2.15细胞核转录因子(NF-κB)的mRNA表达水平的影响：与空白对照组比较,苦参乌梅汤不同剂量组(0.156mg/ml、 0.625mg/ml和2.500mg/ml)作用HepG2.2.15细胞96h后,细胞内NF-κB的mRNA表达水平均下调,差异均具有统计学意义(P<0.05),当苦参乌梅汤浓度为2.500mg/ml时,NF-κB的mRNA表达相对值最低,为0.724±0.021。2.苦参乌梅汤对HepG2.2.15细胞促炎性细胞相关因子(IL-18、IL-2、 IL-6、IFN-γ和TNF-α)的mRNA表达水平的影响：与空白对照组比较,苦参乌梅汤不同剂量组(0.156mg/ml、0.625mg/ml和2.500mg/ml)作用HepG2.2.15细胞96h后,细胞内IFN-γ和TNF-α的mRNA表达相对值均降低,当苦参乌梅汤的浓度为2.500mg/ml时,IFN-γ和TNF-α的mRNA表达相对值最低,分别为0.579±0.553和0.713±0.104,但与空白对照组相比均无显著性差异(P>0.05)；IL-18的mRNA表达相对值均升高,当苦参乌梅汤的浓度为2.500mg/ml时,IL-18的1-nRNA表达相对值最高,为5.254±0.109,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05)；IL-2的mRNA表达相对值低剂量组降低,中剂量组和高剂量组均升高,但与空白对照组比较均无显著性差异(P>0.05)；IL-6的nRNA表达相对值均降低,当苦参乌梅汤的浓度为2.500mg/ml时,IL-6的mRNA表达相对值最低,为0.711±0.183,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。3.苦参乌梅汤对细胞趋化因子(CCL20)表达水平的影响：与空白对照组比较,苦参乌梅汤不同剂量组(0.156mg/ml、0.625mg/ml和2.500mg/ml)作用HepG2.2.15细胞96h后,细胞内CCL20的mRNA表达相对值低剂量组和高剂量组均降低,而中剂量组升高,并且各剂量组CCL20的mRNA表达相对值与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05),当苦参乌梅汤的浓度为0.625mg/ml时,CCL20的mRNA表达相对值最高,为1.349±0.203。4.苦参乌梅汤对JAK-STAT信号转导通路部分信号相关细胞因子(STAT1、STAT2、ISGF3、OAS和PKR)的mRNA表达水平的影响：与空白对照组比较,苦参乌梅汤不同剂量组(0.156mg/ml、0.625mg/ml和2.500mg/ml)作用HepG2.2.15细胞96h后,细胞内STAT1的mRNA表达相对值低剂量组降低,中剂量组和高剂量组均升高,STAT2的mRNA表达相对值均降低,当苦参乌梅汤的浓度为2.500mg/ml时,STAT1和STAT2的mRNA表达相对值最高,分别为1.110±0.116和0.900±0.039,但与空白对照组相比均无统计学意义(P>0.05); ISGF3、OAS和PKR的mRNA表达相对值低剂量组均降低,中剂量组和高剂量组均升高,当苦参乌梅汤的浓度为2.500mg/ml时,ISGF3、OAS和PKR的mRNA表达相对值最高,分别为1.314±0.113、3.779±0.208和1.336±0.129,并且与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论：1.苦参乌梅汤可能通过降低HepG2.2.15细胞内NF-κB的mRNA表达水平,通过NF-K B信号传导系统发挥抗HBV的作用。2.苦参乌梅汤可能通过使免疫反应由Th2型向Thl型逆转,提高Thl型相关因子如IL2等的表达,减少Th2型相关因子如IL6等的表达,促进细胞免疫,从而达到抗HBV的效果。3.苦参乌梅汤调节免疫系统的作用与其用药剂量有密切的关系,可能具有双向的良性调节作用。4.苦参乌梅汤可能通过JAK-STAT细胞信号转导通路,提高PKR、 2’5’-OAS等抗病毒效应蛋白的mRNA表达水平,达到抗HBV的效果。5.苦参乌梅汤抗HBV的机制主要包括抗病毒和调节免疫两个方面,并且在低剂量时以调节免疫为主,高剂量时以抗病毒为主。