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实验目的:Dermatopontin(DPT)是一种22 kDa的细胞外基质蛋白,具有促进细胞粘附和细胞外基质形成的功能。本课题组在之前的研究中已证实DPT在睾丸组织的Sertoli细胞中存在表达,同时体外实验显示,在CdCl2诱导的小鼠睾丸Sertoli细胞功能障碍模型中DPT对claudin-11的表达具有调节作用,这提示DPT可能与睾丸功能障碍有关。为此,本研究旨在进一步通过体内实验揭示DPT的表达与小鼠睾丸功能障碍的关系。实验方法:1.利用腹腔注射busulfan构建小鼠睾丸功能障碍模型。2.PCR和Western blotting方法分析小鼠睾丸组织中DPT的表达情况。3.为了研究体内DPT过表达对睾丸功能的影响,我们构建了DPT过表达转基因小鼠模型。4.运用免疫组织化学的方法检测DPT过表达转基因小鼠模型中睾丸组织DPT蛋白表达情况。5.使用HE染色的方法观察DPT过表达转基因小鼠模型中睾丸组织曲细精管的组织形态学改变。6.使用Western blotting方法检测DPT过表达转基因小鼠模型中睾丸组织claudin-11和zonula occludens-1(ZO-1)的表达量。实验结果:1.小鼠睾丸功能障碍模型中出现睾丸组织形态学损伤,表明小鼠睾丸功能障碍模型已成功构建。2.小鼠睾丸功能障碍模型中DPT的表达量与睾丸功能障碍程度呈现正相关,表明DPT表达量的增加与小鼠睾丸功能障碍存在密切联系。3.DPT过表达转基因小鼠模型中出现睾丸组织形态学损伤,进一步证实DPT表达量的增加与小鼠睾丸功能障碍存在密切联系。4.DPT过表达转基因小鼠模型中claudin-11和ZO-1的表达量降低,这表明DPT表达量的增加可能会损伤小鼠血睾屏障的完整性。实验结论:本研究证明DPT表达量的增加与睾丸损伤有关,可能与血睾屏障的损伤存在关联,进而造成小鼠睾丸功能障碍。DPT表达量的增加意味着小鼠睾丸功能异常。