论文部分内容阅读
目的研究肝损伤后炎症因子IL-6、MCP-1、TGF-β、TNF-α表达水平的变化,及肝损伤后肝细胞周期变化,旨在探讨肝损伤后炎症因子与细胞周期之间的关系,为肝脏疾病临床治疗提供思路。方法1、HepG2细胞株培养于DMEM培养基。细胞生长至对数期时,用不同浓度乙醇对细胞进行处理,共分为三组（空白对照组、0.001M、0.01M）,应用qRT-PCR技术检测不同浓度乙醇作用后细胞中mRNA的表达量。2、Hep3B细胞株培养于MEM培养基,HepG2和L02细胞株培养于DMEM培养基,三系细胞在不同浓度乙醇或四氯化碳处理24小时后,采用流式细胞周期仪检测各组细胞周期变化。用不同浓度四氯化碳作用L02细胞3小时、6小时、12小时、24小时后检测各组细胞周期变化,用SPSS 17.0统计软件进行数据分析处理,每个样品至少重复三次实验。结果1 Real-Time PCR结果与空白对照组相比,乙醇浓度为0.001M、0.01M时IL-6mRNA的表达水平增高;且乙醇浓度为0.01M时,差异具有显著统计学意义（以actin作为内参,P<0.05）。与空白对照组相比,乙醇浓度为0.001M、0.01M时MCP-1mRNA的表达水平增高;且乙醇浓度为0.01M时,P<0.01,差异具有显著统计学意义。与空白对照组相比,0.001M组和0.01M组TGF-βmRNA表达水平有所增高,且乙醇浓度为0.001M时,P<0.001,差异有显著统计学意义。与空白对照组相比,0.001M组和0.01M组TNF-αmRNA的表达水平有所增高,乙醇浓度为0.001M时,P<0.05,差异有显著统计学意义。2细胞周期检测结果不同浓度乙醇和四氯化碳作用Hep3B、HepG2和L02细胞后,可见各组细胞G2期细胞比例有所增多。不同浓度CCl4处理L02细胞3、6、12、24小时后,见随着CCl4作用时间延长,G2期细胞百分率明显增加。和未经处理的L02相比,CCl4浓度越高,处理时间越长,G2期细胞比例增多越显著,P<0.05,差异具有统计学意义。结论肝损伤后IL-6、MCP-1、TGF-β、TNF-α表达量发生变化,均可见不同程度的升高。损伤后细胞出现G2/M期细胞比例增多,提示炎症介质、细胞因子对肝细胞周期过程中信号通路的激活、调节作用,其具体机制有待进一步研究。