类志贺邻单胞菌（Plesiomonas shigelloides）是鱼类养殖中常见的病原菌,对鱼类有强的致病性。目前,由于细菌耐药性问题日益严重,寻找一种能替代抗生素的安全、新型抗菌药物迫在眉睫。噬菌体（Phage）作为细菌病毒,具有专一性,可快速裂解宿主菌,且对其它种群不会产生影响,将作为一类防治鱼类细菌性病害的新型抗菌药物逐渐受到研究人员的高度重视。本研究以类志贺邻单胞菌为宿主菌,从草鱼肠道中分离到1株烈性噬菌体,命名为PSP01。该噬菌体由一个二十面体对称的头部和一个长且非收缩性的尾部组成,属于长尾噬菌体科（Siphoviridae）。该噬菌体的最佳感染复数为1,一步生长曲线结果表明,潜伏期为30min,裂解期为140 min,从170 min开始进入平稳期。噬菌体PSP01在环境中的稳定性较好,在p H值3-12、温度-20℃-50℃和Na Cl浓度0.1%-3.5%下1 h,仍保持较好的活性。对噬菌体PSP01的全基因组测序与分析,结果显示,基因组全长为97551 bp,GC含量为41.65%,共含有152个开放阅读框（ORF）,其中37个功能已知,其余115个为假想蛋白。37个功能已知ORF主要为结构、包装、裂解、DNA复制与调控等功能。根据末端酶大亚单位序列构建系统发育树,发现噬菌体PSP01与弧菌噬菌体（Vibrio phage）Ceto的亲缘关系较近。接下来,对噬菌体PSP01的裂解系统活性进行了研究,发现该噬菌体的裂解盒包含3个基因,其编码产物分别是穿孔素（HolPSP）、内溶素-1（Lys PSP-1）和内溶素-2（Lys PSP-2）。利用生物信息学软件对裂解盒的3个基因及其产物进行了分析,HolPSP、Lys PSP-1和Lys PSP-2分别位于ORF44（693 bp）、ORF45（675 bp）和ORF53（441 bp）;HolPSP无信号肽（signal peptide,SP）,含有一个跨膜结构域（transmembrane domain,TMD）;Lys PSP-1无SP和TMD;Lys PSP-2在N-端含有一个SP,无TMD。将这3个基因分别在大肠杆菌（Escherichia coli,E.coli）BL21（DE3）中进行单独表达,HolPSP与Lys PSP-2可以使大肠杆菌OD600值发生下降,细胞活性测定显示有部分红色荧光出现,β-半乳糖苷酶活性检测显示上清液颜色由无色变为黄色,说明HolPSP和Lys PSP-2对大肠杆菌有裂解作用;Lys PSP-1在表达过程中没有使大肠杆菌OD600值发生下降,细胞活性测定显示均为绿色荧光,β-半乳糖苷酶活性检测显示上清液颜色无变化,说明Lys PSP-1对大肠杆菌无裂解作用。将HolPSP与Lys PSP-1在大肠杆菌BL21（DE3）中共表达,发现大肠杆菌OD600值下降的程度比单独表达HolPSP下降程度更明显,细胞活性测定显示有大部分红色荧光出现,β-半乳糖苷酶活性检测显示上清液颜色比单独表达HolPSP的颜色深,说明HolPSP与Lys PSP-1具有协同裂解大肠杆菌的作用。将缺失TMD的HolPSP与Lys PSP-1在大肠杆菌BL21（DE3）共表达,发现大肠杆菌OD600值没有下降,β-半乳糖苷酶活性检测显示上清液颜色无变化,说明TMD对于HolPSP裂解活性是必需的。将缺失SP的Lys PSP-2在大肠杆菌BL21（DE3）中表达,大肠杆菌OD600值没有下降,β-半乳糖苷酶活性检测显示上清液颜色无变化,说明SP对于Lys PSP-2的裂解活性也是必需的。最后,研究了噬菌体PSP01对草鱼感染类志贺邻单胞菌的保护作用。通过腹腔注射病原菌与噬菌体,结果显示,与没有注射噬菌体的草鱼相比,注射了噬菌体的草鱼存活率提高了33.3%。注射后36 h,取草鱼脾脏进行病理学观察,发现注射了噬菌体的草鱼脾脏病理症状有所减缓。综上所述,本研究对筛选的噬菌体PSP01及其裂解盒进行了研究,并对噬菌体PSP01对草鱼感染类志贺邻单胞菌的保护作用进行了评价,为利用噬菌体防治鱼类病原菌提供了新的数据和理论依据。