猪黄体不同发育时期活性氧及多种抗氧化酶变化规律的研究

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黄体对维持卵巢功能及早期妊娠具有非常重要的作用。黄体的发育与退化涉及一系列的血管发生和细胞凋亡过程,而ROS也是导致细胞凋亡的重要原因之一。有研究表明ROS与多种抗氧化酶会影响多种动物黄体的发育和退化。但尚未有人对猪黄体做过此方面的研究。所以,本试验的目的是研究ROS及抗氧化酶在猪黄体组织发育及退化过程中的变化规律,为诠释猪黄体抗氧化机制补充理论基础并提供新的思路。本试验以猪黄体为材料,通过其形态、孕酮水平以及石蜡切片后内部血管比例,将黄体准确地分为初期,中期,后期以及白体。通过冰冻切片及DHE荧光染色技术检测猪不同时期黄体内部ROS水平,通过PCR对其Mn-SOD、CAT以及GPx多种抗氧化酶的表达量进行检测。每组试验均进行3次重复。结果表明:猪黄体组织内ROS水平在后期极显著高于其他时期(p<0.01);中期极显著高于初期和白体(p<0.01);而初期与白体差异不显著。Mn-SOD表达量在初期显著高于中期和后期(p<0.05),白体显著高于中期(p<0.05),且极显著高于后期(p<0.01),中期显著高于后期(p<0.05)。CAT表达量在各时期无显著性变化。GPx1基因的初期表达量显著高于中期(p<0.05),且极显著高于后期(p<0.01),白体也显著高于中期与后期(p<0.05),中期显著高于后期(p<0.05)。而在GPx3基因中,初期显著高于其他时期(p<0.05),而其他3个时期互相之间差异不显著。在GPx4基因中,初期与白体均极显著高于中期和后期(p<0.01),中期显著高于后期(p<0.05)。即猪黄体内部ROS水平会随猪黄体周期性发育进程出现规律性升高,而Mn-SOD与GPx的表达水平则出现规律性的下降,CAT表达量不随黄体的变化而变化。所以我们可以得到结论:1.ROS是猪黄体发育及退化的影响因素。2.Mn-SOD与GPx是猪黄体发育及退化的影响因素。3.CAT不是猪黄体发育及退化的影响因素。4.ROS水平与Mn-SOD及GPx表达水平呈负相关关系。
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