论文部分内容阅读
目的观察血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对外周血循环纤维细胞(CFs)数量与功能的影响。方法采用Ficoll密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,培养14天后,获得贴壁的CFs,利用其表面双重表达CD34和Ⅰ型胶原蛋白的特点对其进行细胞免疫荧光染色鉴定。于此同时,将细胞分成四组,即:对照组,预先加入Ang-(1-7)的拮抗剂A-779组,预先加入左旋硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)组,同时预先加入两种试剂组,给予CFs不同浓度Ang-(1-7)(10nM,100nM,1μM or10μM)分别刺激24h、48h、72h。采用苏木精-伊红染色计数、CCK-8法测定CFs的增殖能力、Annexin V/Propidium Iodide标记法测定细胞凋亡能力,消化法测定羟脯氨酸浓度间接观察细胞外胶原蛋白含量,利用western bolt来检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,利用Griess方法来检测CFs分泌的一氧化氮(NO)含量。结果:Ang-(1-7)(?)(?)促进CFs的凋亡以及增加eNOS/NO的产生;Ang-(1-7)呈浓度及时间依赖性降低CFs的数量、增殖能力以及胶原蛋白的分泌能力。结论Ang-(1-7)可能通过上调eNOS/NO减少CFs数量并抑制CFs的功能。