埃博霉素(epothilone)是一类16元大环内酯类化合物,来源于纤维堆囊菌的次级代谢产物,具有简单的化学结构和一定的亲水性和疏水性,易溶于甲醇、乙酸乙酯等溶剂,在水中也有一定的溶解度。埃博霉素具有对抗多种肿瘤细胞的生物活性,而且举世瞩目,其作用机制和目前最为畅销的抗肿瘤药物紫杉醇类似,而紫杉醇来源于濒危的珍贵树种红豆杉,和紫杉醇不同的是,埃博霉素可以通过微生物发酵生产,从而改变紫杉醇生产破坏生态环境的恶劣影响,但是至今国内还没有报道从纤维堆囊菌发酵液中高效分离埃博霉素的最佳方法。因此,本实验分析了不同单一有机溶剂和复合溶剂体系对大孔树脂吸附的纤维堆囊菌发酵产物中埃博霉素的萃取效果,结果显示四氯化碳的萃取效果远高于其他溶剂,其萃取率为甲醇萃取的48%,但萃取纯度达到39.3%,是甲醇萃取法的19.65倍,采用此法可以大大简化后续分离工艺。随后我们对四氯化碳萃取方法进行了优化,确定了四氯化碳直接萃取的最佳提取方案,并对产物进行分子筛层析分离,高效液相色谱检测。而且,我们还分析了酸碱处理法对发酵产物中油脂的去除效果,为实现埃博霉素工业化生产的提供了一定的理论指导。最后,为了提高埃博霉素的提纯率和回收率,该研究还对埃博霉素的甲醇萃取液进行了不同条件的LH-20分子筛的柱层析分离纯化。结果显示,当使用100%的甲醇的为流动相进行分子筛LH-20层析分离时,杂质的去除率低,埃博霉素的分离度不高,因此后续便更换不同的流动相进行逐一验的层析分离,对分子筛层析的分离条件进行优化,再根据不同流动相的分离效果,比较它们对埃博霉素及杂质的分离能力,从中分析找出最合适的层析分离条件。最终,该研究表明,当流动相使用二氯甲烷／甲醇的比例为3：2时,埃博霉素A和埃博霉素B的分离度最高,效果最佳,70%甲醇次之,正己烷的分离效果最差。并且,该研究另有数据显示,LH-20分子筛凝胶柱层析还可以与活性炭吸附柱配合使用,以达到更好的分离效果。