海洋侧孢短芽孢杆菌Lh-1抗菌活性物质的分离、性质及应用研究

来源 :上海水产大学 上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liunian2008
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采用超滤、DEAE-Sephadex A25和CM-Sepharose FF离子交换层析及HPLC反相层析等步骤得到了海洋侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)的抗菌活性物质,命名为R-1。经质谱测定其分子量为1608.023 Da,B10-RAD等电聚焦测得其pI为8.55,氨基酸分析表明该物质由Leu、Tyr、Val、Ile、Lys、Gly、Met、Ser、Ala九种氨基酸组成,其中疏水氨基酸居多。茚三酮反应阳性,推测R-1含有α-氨基酸。 对抗菌物质的理化性质研究发现,该抗菌物质具有极强的耐热、耐酸碱特性,在pH 11.0~12.0条件下,121℃处理1h,其活力保持在75%以上。经三种蛋白酶(碱性蛋白酶、胰酶、胃蛋白酶)处理后,活性保持在80~//0以上。常见的金属离子Ba<2+>、Li<+>、Mg<2+>、Mn<2+>、Fe<2+>、Cu<2+>、Sr<2+>、Pb<2+>、Zn<2+>、Ca<2+>等都对抗菌物质的抑菌活性有不同程度的提高。与化学试剂配伍性良好,仅吐温和SDS对其影响较大。常见的增稠剂如明胶、聚乙二醇、琼脂、海藻酸钠、胰蛋白胨等对抗菌物质的抑菌活性无明显影响。抗菌物质对有机溶剂如丙酮、甲醇、正己烷等有良好的耐受性,并且在乙醇、甲醇、丙二醇等醇类有机溶剂中有溶解性。 抗菌物质R-1抑菌谱广泛,对食品腐败菌、致病性革兰氏阴性、阳性菌及少数真菌均有抑菌活性。通过对抗菌物质作用过的大肠杆菌及白假丝酵母菌的投射电镜超微结构观察表明,抗菌物质R-1的杀菌机制主要是作用于细胞膜最终致死细胞。抗菌物质对鸡新城疫病毒(NDV)的试验结果表明,该抗菌物质毒副作用小,在浓度达100mg/mL时也不会对鸡胚造成影响;通过体外杀灭试验及体内攻毒试验结果比较得出,该抗菌物质对NDV的体外杀灭效果要优于体内攻毒,这可能是由于体内攻毒试验过程中病毒在鸡胚体内的增殖造成了杀灭的困难。 通过对抗菌物质的冷却肉保鲜结果分析得到,抗菌物质0.05%与氯化钠1.5%,葡萄糖4%、甘氨酸6%,山梨酸钾0.05%及抗坏血酸0.3%配合使用对冷切肉的感官(色泽、气味、弹性、粘度、肉汤试验)效果无不良影响。对冷却肉的挥发性盐基氮(TVB-N)有良好的抑制作用,在保存了30 d后其挥发性盐基氮含量仅高出一级限度的1.7%。同时其广泛的抑菌作用有效的抑制了细菌的生长,可见其保鲜效果良好。
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