一株嗜盐产甲烷菌的分离、生物学特性、系统发育分析及产甲烷活性污泥利用CO的初步研究

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从沼气所提供的鸭湖(咸水湖)沉积物中进行产甲烷菌分离。对得到的一株产甲烷菌MQ-4进行了生理生化和16S rDNA分析。 MQ-4菌株为革兰氏阴性菌、不运动、球状、直径约1μm。菌落圆形湿润,从无色透明到黄色。该菌能利用甲酸钠及H2/CO2产甲烷,不利用甲醇、三甲胺。最适生长温度35℃,最适pH7.0,最适盐浓度4%。 用PCR技术扩增了MQ-4菌株的16S rDNA序列,并对其进行了克隆和测序。该16S rDNA序列在NCBI进行BLAST结果表明,所获得的同源序列为产甲烷菌16SrDNA序列,其中相似性最高的为甲烷带状菌属的菌株,其中MQ-4与Methanoculleus marisnigri,Methanoculleus submarinus,Methanoculleus chikugoensis的同源性最高,均为98%。在此基础上以Methanogenium cariaci DSM 1497的16S rDNA序列作为外群种,构建系统发育树。采用Clustalx(1.8)进行同源性排列,再运用Phylip算出其NJ树,并用Bootstrap进行检验(替代率为1000)发育树。MQ-4菌株与Methanoculleus marisnigri,Methanoculleus submarinus,Methanoculleus chikugoensis都聚在同一个分支里,与三种菌的亲缘关系都很近,从进化树上还无法判断MQ-4菌株属于哪个种。种水平上鉴定
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