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本实验根据已发表的狂犬病病毒ERA株G基因序列，设计了九对引物，运用RT-PCR的方法分别扩增出了G基因全序列和G基因的八个部分片段，即G1、G2、G3、G4、G5、G6、G7、G8。将全G基因和G基因的八个片段分别克隆到PMD18-T克隆载体上，用EcoR Ⅰ／BamH Ⅰ酶切pMD-G1、pMD-G3、pMD-G5、pMD-G7，用BamH Ⅰ／Pst Ⅰ酶切pMD-G2、pMD-G4、pMD-G6、pMD-G8，用EcoR Ⅰ／Pst Ⅰ酶切pMD-G和杆状病毒表达载体PAcSG2，回收纯化目的片段。将G基因与PAcSG2连接，G1、G2与PAcSG2连接，G3、G4与PAcSG2连接，G5、G6与PAcSG2连接，G7、G8与PAcSG2连接，构建了重组杆状病毒转移载体PAc-G和重组杆状病毒缺失突变转移载体PAc-G1G2、PAc-G3G4、PAc-G5G6、PAc-G7G8。每一株均缺失104个氨基酸，缺失部位从第21位氨基酸开始，至第437位氨基酸。 设计了另一对引物，以构建好的重组杆状病毒转移载体质粒为模板，运用PCR的方法分别扩增出了目的基因G和G1G2、G3G4、G5G6、G7G8。分别将之克隆到PMD18-T克隆载体上，用EcoR Ⅰ／Bstx Ⅰ酶切后，纯化回收目的片段。亚克隆到真核表达载体pIRESneo上， 广而大学硕士毕业论文构建T重组真核表达载体p一G、p一GIGZ、p一G3e4、p一GsG6、P一G7GS。 运用阳离子脂质体介导的外源基因转染法，将重组真核表达质粒转染仓鼠肾细胞(BHK21)。通过新霉素G418筛选，得到转染了重组质粒p一G7GS的抗G418的阳性克隆细胞。用PcR的方法扩增出目的带，证实BHK21细胞染色体中含有缺失了部分片段的G基因。为今后进一步研究G基因的致病性，找到与细胞融合有关的氮基酸区域奠定了坚实的基础。