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目的:苯丙酮尿症(PKU)属于具有遗传性质的代谢疾病,其发病原因主要源于人体内的苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因发生改变,引起PAH活性减少或消失,导致肝脏内的苯丙氨酸代谢异常。PAH基因突变常引起PKU,在我国通过分析580多万新生儿资料,得出在中国PKU发病率是1/11144。PAH在苯丙氨酸转化为酪氨酸的过程中起着核心调节作用,调控机体内的苯丙氨酸正常代谢速度;PAH位于染色体12q23.2,含有13个外显子和12个内含子,临床研究发现PKU患者检测出基因突变的位点有约700个,约67%为错义基因,而发生基因突变的位点常导致PAH缺乏,引起PKU表型的变化。连云港所在地区,经济较差,生活落后,即使诊断出PKU,其也缺乏有效治疗,很多患者由于拖延治疗,引起智力低下或高苯丙氨酸血症。因此,探索PKU人群的基因突变类型,能够帮助降低PKU患儿出生率,优化人口出生,从而降低PKU发生率。本课题我们收集连云港地区PKU患者,分析该地区患者中PAH基因突变分布特点,获取PAH基因发生突变的热点区域和位置,并与全国和世界资料相比对,以期获取其相关性的临床资料,为连云港地区PKU患者基因诊断、产前诊断、早期治疗、遗传咨询、优生优育等提供可靠参考。方法:收集2009年1月~2015年6月来自连云港妇幼保健院新生儿筛查中心的40个PKU患者进行探索,均为汉族,其彼此之间没有亲缘关系。首先设计13对引物通过PCR扩增,引物包括PAH基因13个外显子、些许启动子区域以及外显子和内含子交界区。其次,PCR产物采取双向Sanger测序,筛查发生突变的位点及区域,依据由基因型预测生化代谢表型的方法进行基因型与生化代谢表型的相关关系分析。通过相关文献,收集国内(天津、陕西、北京、新疆、山西、青海、甘肃、邯郸、苏州地区)以及国外PAH基因突变类型和突变率,并和连云港地区的进行对比。结果:40个PKU患者共有80个PAH等位基因,发生突变的有74个,占据92.5%。发生双等位基因突变的患者有35位,单等位基因杂合突变的是5位;检测出发生复合杂合突变的患者共26位,纯合突变的为9位。对发生变异位点的父母进行DNA序列测定,均遗传自父母,而非自发突变。40个PKU患者中得到11种PAH基因突变,涵盖24种类型,即错义突变11种(45.8%)、剪接突变9种(37.5%)、无义突变3种(12.5%)、缺失突变1种(4.2%)。74个被检出等位基因中以R243Q(14.86%)突变发生频率最高,紧接着是R111X(12.16%)、R241C(10.80%)、IVS2+5G>T(9.46%)、V399V(8.10%)、Y356X(6.75%)、EX6-96A>G(5.40%)、IVS7-1G>A(5.40%)、IVS7+2T>A(4.05%)。连云港地区R243Q的相对频率高于山西地区,显著低于陕西、北京、新疆、青海、甘肃、邯郸6个地区,和天津、苏州地区无显著性差异。R111X突变在连云港地区检出率显著高于陕西、北京、新疆、山西、青海、甘肃、邯郸、苏州地区。结论:连云港地区PKU患者PAH基因突变携带显著的热点突变R243Q(14.86%)、R111X(12.16%)、R241C(10.80%);连云港地区的PAH基因突变具有复杂并多样性特点:与北方部分地区相似,与南方地区以及国外比较差异较大。