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热休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)是热休克蛋白家族中最重要的一类家族成员，它具有“分子伴侣”、细胞保护、抗凋亡以及肿瘤免疫治疗等独特复杂的生物学功能，因此，它的研究已成为生命科学领域研究的热点之一。 本研究首先电子克隆了蓝蟹(Callinectes sapidus)HSC70基因cDNA的全长序列以及日本对虾(Marsupenaeus japonicus)HSP70部分序列，设计引物，采用RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends)相结合的方法，从35℃热休克的克氏原螯虾(Procambarus Clarkii)的心脏组织克隆得到长2271bp的HSP70基因(命名为Pro-HSP70基因)，编码635个氨基酸的多肽分子，推测的分子量为70kDa，理论等电点为5.34。经基因组DNA扩增，发现该基因不含内含子。与已知的29个其它生物的HSP70或HSC70蛋白序列的同源性为68.4～86.3％，通过构建系统发生树，发现Pro-HSP70可能是一种诱导型HSP70基因。 从未经热休克的刀额新对虾(Metapenaeus ensis)的心脏组织中克隆得到长2242bp的HSC70(heat shock cognate 70)基因(命名为Met-HSC70基因)，包括长1947bp的完整编码区，在poly(A)尾上游发现一加尾信号(AATAAA)。编码648个氨基酸的多肽分子，分子量为71kDa，理论等电点为5.06。经基因组DNA扩增，发现该基因含有内含子。与已知的29个其它生物的HSP70或HSC70蛋白序列构建系统发生树，发现Met-HSC70可能是一种组成型HSP70基因。 从35℃热休克的日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的心脏组织克隆得到长2553bp的HSP70基因(命名为Mac-HSC70基因)，编码649个氨基酸的多肽分子，推测的分子量为71kDa，理论等电点为5.04。通过序列分析构建系统发生树，发现Mac-HSC70可能是一种组成型HSP70基因。 采用半定量RT-PCR方法，对两种虾的HSP70组织表达进行研究。克氏原螯虾的HSP70 mRNA正常情况下在心脏、肌肉、血液、消化腺、触角腺、精巢和肠组织中表达量相当低下，但是经过35℃、2h热休克以后，表达量显著升高，进一步说明Pro-HSP70是一种热诱导型的热休克蛋白，其中心脏的表达量为最高。在1～8h的热应激实验中，心脏和触角腺Pro-HSP70 mRNA的变化呈上升趋势。非应激状态下，刀额新对虾在心脏、肝胰腺、鳃、脑、胃、精巢和肠中均大量表达HSC70 mRNA，表明克隆得到的Met-HSC70为组成型HSC70基因。