牛乳是富含丰富营养的天然饮品,但是牛乳中较高的乳糖含量(5%),使人们饮用后出现不适。乳糖酶可以将乳糖分解从而产出易于人们消化吸收的低乳糖乳制品。近年来,应用乳糖酶治疗乳糖不耐症,以及处理加工牛乳及其它乳制品,取得了明显效果。但是却未能被广泛的应用,主要原因是乳糖酶的生产成本较高,且在加工过程中混入其它酶制剂。目前采用将乳糖酶进行固定化的方法解决这些问题,固定化的乳糖酶,同时可以反复使用、生产成本较低,而且其热稳定性较游离乳糖酶大大提高。但是现有的固定化技术都有各自的优势及不足,寻找具有普适性的固定化技术路线是该领域的工作者们所关心的重点。为此,我们将"Fish-in-net"固定化技术与分子印记技术相结合,制备了具有较高活性与重复利用率的固定化乳糖酶。鉴于牛乳是富养培养基,易于染菌,上述酶制剂无法抑制牛乳中细菌的增生,为探索能集乳糖水解与抗菌功能一体的酶制剂,我们又进行了"Fish-in-net"双功能酶制剂的固定化探索与研究。我们将乳糖酶包埋于硅基介质后,通过戊二醛交联试剂将溶菌酶与硅基介质共价连接,探索了拓展于底物印迹的"Fish-in-net"酶固定化技术的双酶固定化方法,研究了双功能酶制剂中固定化乳糖酶的比活力、重复利用率和热稳定性；以溶壁微球菌为靶标,研究了双功能酶制剂的抗菌能力。实验结果表明：1、利用乳糖分子作为印记分子合成的固定化乳糖酶的比活力较传统的"Fish-in-net"固定化乳糖酶比活力有明显的提高；2、固定化后的乳糖酶热稳定性明显提高,最适反应温度、pH未见明显变化；3、固定化的乳糖酶重复利用度性能良好,重复九次利用活力仍达80%以上；4、固定化乳糖酶共价交联溶菌酶后溶菌酶具有较高的抗菌能力。综上所述,通过这种含有双酶活性的生物材料克服了在实际生产应用中常见的染菌问题,外周共价键连接的溶菌酶不易脱落,且不干扰孔道内乳糖酶底物及产物的传质。分子印记技术与"Fish-in-net"技术结合固定乳糖酶,并交联溶菌酶,对于这样的技术问题,具有潜在的应用前景。