目的:观察BMSCs移植后对CIA大鼠CXCL10/CXCR3趋化轴和RANKL/OPG骨破坏通路的影响,探讨MSCs在体内发挥免疫调节作用的机制。方法:1.饲养Wistar大鼠,弗氏完全佐剂加II型胶原乳液2次免疫动物,经观察大鼠症状(大体观、关节炎指数、双足肿胀度)、影像、病理评估,建立CIA模型。2.采用密度梯度离心分离MSCs、结合贴壁培养法体外培养大鼠MSCs;通过流式细胞术检测BMSCs表面抗原CD44、CD105、CD29、CD34、CD45、CD31,排除法鉴定所培养的细胞为BMSCs。3.造模成功的CIA大鼠随机分为CIA模型组、MSCs治疗早期(3d)组、MSCs治疗晚期(30/42d)组,同时设立正常对照组,每组8只。经尾静脉移植BMSCs,每只大鼠移植的细胞数为1×107/kg。对照组以同样的方法注射等量的生理盐水。4.各组大鼠干预后内眦静脉取血,应用Elisa法检测血清RANKL、OPG、CXCL10水平;取各组大鼠脾脏、淋巴结、滑膜等脏器,应用免疫组化检测组织CXCR3、TRAF6表达水平;应用RT-PCR检测各组织CXCL10/CXCR3、RANKL/OPG、TRAF6 mRNA相对表达量,应用t检验或对各组应用Wilcoxon秩和检验进行组间比较。结果:1.Witar大鼠骨髓中成功分离获得间充质干细胞,具有骨髓间充质干细胞的形态学特点,表型鉴定表达CD44、CD105、CD29,不表达CD45、CD34、CD31;2.BMSCs移植可以改善CIA大鼠的关节炎指数、关节肿胀程度、X线改变、病理改变;3.BMSCs移植可抑制CIA大鼠CXCL10/CXCR3趋化轴水平,表现为(1)抑制血清CXCL10水平;(2)抑制淋巴结、滑膜组织趋化轴受体CXCR3蛋白的表达;(3)抑制脾脏、淋巴结、滑膜CXCL10 mRNA的表达,抑制淋巴结、滑膜CXCR3mRNA的表达;4.BMSCs移植可抑制CIA大鼠RANKL/OPG通路水平,表现在(1)抑制血清RANKL水平,降低血清RANKL/OPG比例;(2)抑制脾脏、淋巴结、滑膜组织骨破坏通路胞内转导信号因子TRAF6的表达;(3)降低淋巴结、滑膜RANKL/OPG mRNA比例,抑制脾脏、淋巴结、滑膜TRAF6 mRNA的表达。结论:1.在CIA大鼠免疫过程中存在CXCL10/CXCR3趋化轴的紊乱,抑制CXCL10/CXCR3趋化轴水平是BMSCs干预缓解CIA大鼠关节炎症状的作用机制之一。2.在CIA大鼠免疫过程中存在RANKL/OPG比例的失调,其表达上调后作用于胞内受体TRAF6,进而引起胞内信号转导,介导骨破坏过程;抑制RANKL/OPG骨破坏通路是BMSCs移植抑制CIA大鼠关节破坏的作用机制之一。