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一、目的1、建立测定人血浆中艾瑞昔布M0及其羟基代谢产物M1和羧基代谢产物M2浓度的HPLC-MS/MS方法；2、评价艾瑞昔布及其代谢产物在重度肾功能不全和肾功能正常受试者体内的药代动力学特征,为肾功能不全患者临床用药提供参考。二、方法1、方法学的建立：此HPLC-MS/MS方法采用液相萃取进行样品前处理,以地西泮为内标(IS)。色谱条件：分析柱为EcLipse XDB-C18(1502.1mm,3.0μm),流动相为含0.1%甲酸的水溶液与含0.1%甲酸的甲醇溶液以体积比3：7混合,流速为0.3mL·min-1。质谱条件：电喷雾离子源,正离子MRM扫描分析,M0、M1、M2和IS的离子通道分别为390.2→236.1、386.1→236.1、400.1→236.1和368.4→294.0amu。2、药动学研究：采用平行、开放,单周期配对设计,先入组重度肾功能不全患者12例,根据肾功能不全组的年龄(±5岁)、性别、体重(±15%)进行匹配再入组12例健康志愿者。餐后,口服艾瑞昔布片100mg,于不同时间点采集血样。采用经验证后的LC-MS/MS法测定艾瑞昔布M0及其主要代谢产物M1和M2的浓度。用WinNonlin软件计算M0,M1和M2的药动参数。使用t检验和Wilcoxon秩和检验对两组间的非房室参数差异进行方差分析。将肾功能指标Ccr与M0,M1和M2主要药动学参数进行相关性分析。三、结果1、方法学考察结果：本研究建立的HPLC-MS/MS方法中M0、M1、M2和IS的典型色谱保留时间分别为2.36min,1.49min,1.53min和3.62min。该方法经准确度、精密度、提取率、特异性实验等验证后符合各项方法学考察要求。血浆中M0、M1和M2的浓度分别在0.1～100、0.2～200和2～2000ng.mL-1范围内线性良好,LLOQ分别为0.1、0.2和2ng·mL-1。2、药动学结果：(1)在肾功能不全受试者中,M0、M1和M2的主要药动学参数Cmax分别为(22.63±16.89)、(71.69±16.79)、(1671.66±576.41) ng·h·mL-1; Tmax分别为(3.50±1.45)、(3.50+1.45)(4.00±1.65)h；t1/2分别为(11.89±7.79)、(25.95±23.68)、(13.41±8.11)h；AUC(0→t)分别为(183.38±125.50)、(647.46±213.74)、(18465.38±8602.21)ng·h·mL-1; AUC(0→∞)分别为(195.33±135.41)、(665.27±220.48)(18581.15±8579.05)ng·h·mL-1; CL/F分别为(1056.38±1180.75)、(169.24±69.68)、(6.62±3.47)L·h-1；V/F分别为(15850.91±18444.30)、(5586.51±4548.44)、(135.36±110.86)L；MRT(0-t)分别为(10.14±2.71)、(18.12±7.63)、(13.31±4.78)h。(2)在健康受试者中,M0、M1和M2的主要药动学参数Cmax分别为(59.94±50.55)、(71.96±15.07)(585.18±190.01) ng·h·mL-1; Tmax分别为(2.63±1.07)、(2.75±0.87)、(2.67±0.78)h；t1/2分别为(8.02±2.97)、(8.16±4.76)、(8.00±3.66)h；AUC(o→t)分别为(477.01±395.73)、(518.58±145.16)、(3855.25±995.14)ng·h·mL-1；AUC(0→∞）分别为(479.39±395.62)、(523.37±144.75)、(3930.04±1018.54)ng·h·mL-1; CL/F分别为(1056.38±1180.75)、(169.24±69.68)、(6.62±3.47)L·h-1；V/F分别为(463.67±463.06)、(205.57±59.68)、(306.58±138.86)L；MRT(o→t)分别为(9.31+2.75)、(8.46±2.12)、(8.83±2.76)h。与健康受试者相比,肾功能不全患者中M0的AUC和Cmax显著降低(P<0.05)；M1的AUC和Cmax升高,但差异不显著(P>0.05),t1/2Tmax、MRT(0-t)V/F显著增大和延长(P<0.05)；M2的Tmax、MRT(0-t)、AUC、Cmax均显著升高(P<0.05),CL/F显著降低(P<0.05)。相关性分析结果显示M2的Ccr与CL/F呈高度相关性(r=0.8665,P<0.05)。四、结论1、本研究中建立的测定人血浆中M0、M1和M2浓度的HPLC-MS/MS方法具有良好的准确度、精密度、灵敏度和特异性,并成功的应用于本课题中受试者体内的M0、M1和M2血药浓度的测定；2、重度肾功能不全使艾瑞昔布两个活性代谢产物M1和M2的血浆暴露量增加,使M1和M2的消除减缓,半衰期延长,建议减小艾瑞昔布在重度肾功能不全患者的临床给药剂量。