目的:建立淋巴瘤病人Fab噬菌体抗体库,筛选并富集特异性抗体。方法:取病理证实为B淋巴细胞瘤的病人20例,每个人抽10ml血液,故新鲜血液共200ml,分离淋巴细胞,提取总RNA,经逆转录合成cDNA,设计多对引物,以PCR扩增抗体轻链和重链Fd段。轻链PCR产物和噬粒载体pComb3经SacⅠ和XbaⅠ酶切,由T4 DNA连接酶连接,热转化感受态大肠杆菌XL1-Blue,扩增后提取噬粒,构建轻链库。轻链库和重链Fd段PCR产物经XhoⅠ和SpeⅠ酶切,以同样方法连接后转化XL1-Blue,加入辅助噬菌体VCSM13,产生噬菌体抗体全库。提取噬粒酶切鉴定轻链库和全库有无插入片段。分别以噬菌体全库和提取的噬粒为模板,以轻、重链不同引物组合进行扩增构建抗体库。结果:提取的淋巴细胞总RNA及逆转录合成的cDNA质量好,部分重链Fd段、部分Κ轻链和λ轻链得到扩增。Fab全库库容达6.6×108,酶切和PCR显示有插入片段。结论:本研究构建的人天然段噬菌体抗体库可为进一步筛选特异性抗体,用于免疫治疗打下基础。