宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤之一，而高危型人乳头瘤病毒（High-risk human papillomavirus, HR-HPV）的持续感染与宫颈癌的发生关系最为密切。目前宫颈癌的发生率逐渐升高，并呈年强化趋势发展，这不仅严重影响着妇女的生活质量，也给妇女的生命及健康带来严重的威胁。因此明确某一地区HPV的感染现状以及流行型别，并了解宫颈病变样本中HPV的基因变异状况，这对指导HPV疫苗的应用推广和新一代疫苗的设计研究以及新的检测方法的建立具有重要的意义。新疆处于我国西北地区，其宫颈癌的发生率较高，尤其是在新疆南部少数民族聚集的区域，但目前对于新疆北疆地区HPV的流行状况以及疫苗还没有研究。　　本实验对新疆北疆部分地区的HPV的流行状况以及宫颈病变样本中HPV基因型的分布以及多重感染与宫颈病变的关系进行了研究。并在此基础上通过对基因变异情况的分析来研究适合该地区的HPV疫苗和和建立。研究方法和实验结果如下：　　1．新疆北疆部分地区HPV的流行状况　　HPV的持续感染是宫颈癌发生的主要原因。为了研究新疆北疆部分地区 HPV的流行状况，和宫颈病变人群中HPV基因型的分布，以及多重感染情况。我们收集了2010年1月-2014年12月就诊于新疆石河子大学第一附属医院妇产科进行第二代杂交捕获法（Hybrid Capture2, HC2）检测的7298位病人的病例资料，并收集了2014年1月-2014年12月就诊病人的宫颈脱落细胞样本，筛选出经病理学诊断有宫颈病变病人的宫颈脱落细胞样本，并对其进行分子检测，结果显示：（1）新疆北疆地区人乳头病毒的发生率仍处于一个较高的水平，其中年龄<25岁和≥55岁时出现感染高峰；（2）HR-HPV的检出率随着宫颈病变等级的增加而增加，而低危型人乳头瘤病毒的感染率（Low-risk human papillomavirus, LR-HPV）随宫颈病变程度的变化而变化不大；（3）在新疆北疆部分地区至少存在29种HPV基因型，其中HR-HPV17种，LR-HPV12种，其中发生率较高的HR-HPV基因型依次为HPV16、53、52、58、35；（4）在多重感染检测中，主要以二重感染为主，其中以HPV16型的合并感染最为常见，还出现了三重、四重、五重、六重感染，并且多重感染与宫颈病变的严重程度无关。　　2． HPV流行基因型 L1基因的克隆与分析　　为了研究新疆北疆地区流行的主要HR-HPV L1基因的变异情况，设计了能够扩增HPV16、52、53、58以及在世界范围内发生率较高且致癌性较强的HPV18型的L1全长序列的引物，并经过测序、拼接、比对后获得L1基因序列全长。通过与现有的疫苗株和美国株序列进行比对后发现，在核酸水平上均发生了突变，有些碱基突变甚至导致了氨基酸的改变。以HPV16 L1基因为例，对新疆株与疫苗株进行分子生物信息学分析，发现两者之间存在差异。这为新疆北疆地区疫苗的引进以及多价疫苗的研发提供理论依据。同时本章还参照以往报道，筛选出保守性较好的多肽片段，为下一章节单克隆抗体的制备奠定基础。　　3． HPV16型单克隆抗体的检测以及双抗体夹心ELISA检测方法的建立　　为了建立适合新疆北疆地区自身发展特点的HPV检测方法，本研究在实验二的筛选得出的保守片段基础上，对多肽片段进行合成，并进行KLH偶联，然后免疫小鼠，最终获得15株含有单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清，Western blot检测后，筛选出两株特异性较好的细胞株，并对其进行纯化，其中一株纯化的单抗进行辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）标记后作为检测抗体，另一株纯化单抗作为捕获抗体，以此为基础建立检测HPV的双抗体夹心ELISA法。通过对抗体稀释液等条件进行优化，确定捕获抗体的最佳浓度为1.69μg/mL，检测抗体的工作效价为1:100，样品反应时间为45 min；酶标抗体作用时间为40 min；显色时间为15 min，用建立的双抗体夹心ELISA方法与TS-PCR（Type-Specific Polymerase Chain Reaction, TS-PCR）方法同时检测66份临床宫颈脱落细胞样本，符合率达到81.8％，结果表明该方法具有较好的特异性及重复性，可初步应用于HPV的检测。