东方百合离体培养与试管鳞茎诱导的研究

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本论文报道了对东方百合进行离体培养的研究结果,包括鳞片外植体的选择与灭菌、鳞茎芽的诱导分化、鳞茎芽的继代培养和增殖、试管鳞茎的诱导、试管苗的生根与移栽等,以建立较完善的东方百合组织培养技术体系。主要结果如下:1、东方百合外层、中层鳞片较适宜的灭菌处理为:10%NaClO 10min+0.1%HgCl2 25min;内层鳞片较适宜的灭菌处理为:10%NaClO 10min+0.1%HgCl2 10min。2、东方百合适宜的鳞片诱导分化培养基为:MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L。不同品种鳞片的芽诱导分化能力不同:索邦鳞茎芽诱导率71.45%,平均生成鳞茎芽数3.95;元帅鳞茎芽诱导率66.06%,平均生成鳞茎芽数3.48;西伯利亚鳞茎芽诱导率56.67%,平均生成鳞茎芽数2.09。同一品种不同部位的鳞片诱导能力也有差异,内层低于外层和中层。3、三种基本培养基对东方百合鳞茎芽的增殖效应:MS>Miller>White。在这三类培养基中,索邦品种芽增殖倍数依次为:4.69、1.83、1.23;西伯利亚品种芽增殖倍数依次为:3.70、1.67、0.83;元帅品种芽增殖倍数依次为3.86、1.85、1.11。4、一定浓度范围内的6-BA、KT和NAA、IBA间的配组对东方百合鳞茎芽的增殖起促进作用。鳞茎组培芽增殖的适宜培养基为:MS+1.0-2.0mg/L 6-BA+1.0mg/L KT+0.2mg/L NAA,不同品种对最佳激素组合浓度略有不同。3个品种间的芽增殖结果比较,以索邦最优。5、不同细胞分裂素种类对芽增殖和壮苗的效果不同。6-BA在芽增殖方面优于同浓度水平的KT;KT在壮苗方面优于同浓度水平的6-BA。6、东方百合增殖培养的适宜代数是3~5代。芽增殖倍数比较:索邦>元帅>西伯利亚。7、适当提高蔗糖浓度能促进东方百合三个品种试管结鳞茎。当蔗糖浓度为80g/L时,东方百合三个品种的结鳞茎率、鳞茎直径和鳞茎鲜重均达到最大值。索邦结鳞茎率为100%,鳞茎直径1.768cm,鳞茎鲜重8.55g;西伯利亚结鳞茎率为100%,鳞茎直径1.709cm,鳞茎鲜重8.01g;元帅结鳞茎率为100%,鳞茎直径1.744cm,鳞茎鲜重8.82g。但当蔗糖至高浓度(>100g/L)则对试管结鳞茎不利,所形成的鳞茎变小。8、培养基中附加香豆素对试管结鳞茎有利。东方百合三个品种索邦、西伯利亚和元帅的香豆素适宜浓度分别为:12mg/L、6mg/L和9mg/L。9、多效唑(MET)的适宜浓度对东方百合三个品种试管结鳞茎有促进作用。索邦的MET适宜浓度为3mg/L;西伯利亚和元帅的MET适宜浓度为2mg/L。10、基本培养基1/2MS比MS更利于东方百合的生根。三个品种的苗素质和根素质比较:索邦>西伯利亚>元帅。11、生长激素NAA、IBA浓度均以0.9mg/L时,适宜东方百合三个品种的生根培养。两种激素比较,NAA的生根效应优于IBA。12、生根粉ABT有良好的发根作用。当ABT浓度为4.0mg/L时,索邦根数最多,为17.95条;当ABT浓度为3.0mg/L时,元帅根数最多,为13.45条;当ABT浓度为2.0mg/L时,西伯利亚根数最多,为12.67条。13、适宜浓度(0.6-0.9mg/L)的多效唑能使苗健壮,苗移栽后成活率也较高。MET浓度过高(>1.2mg/L)会抑制试管苗的生长。14、不同种类基质对试管苗移栽生长影响不同。单一基质比较:泥炭>菜园土>细沙>黄泥,索邦品种在泥炭中的成活率为98.91%,西伯利亚为84.62%,元帅为90.00%。复合基质效果优于单一基质,泥炭1/2+珍珠岩1/4+菜园土1/4是东方百合三个品种较为理想栽培基质。在此复合基质中,索邦品种成活率为100%,西伯利亚为90.00%,元帅为95.90%。品种间移栽成活率、抗逆性、适应力比较:索邦>元帅>西伯利亚。
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