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第一部分人膀胱移行细胞癌上皮间质转化与核转录因子FOXQ1的关系目的探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)上皮间质转化与核转录因子FOXQ1的相关性，以及FOXQ1与膀胱癌临床病理特征之间的关系。方法选用膀胱移行细胞癌手术切除标本65例，每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织及其远端正常粘膜组织对照。采用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测各例标本中转化生长因子TGF-β1、核转录因子FOXQ1及上皮间质标记物E-cadherin和Vimentin的表达，并分析与临床病理因素之间的关系。结果(1) FOXQ1在BTCC组织中的表达高于正常粘膜组织(89.2%比13.8%，P<0.05)，其在肌层浸润性癌中的表达高于浅表性癌(97.3%比78.6%)，在有淋巴结转移癌中的表达明显高于无淋巴结转移癌(100%比86.8%)；TGF-β1在BTCC组织中的表达高于正常黏膜(76.9%比26.2%，P<0.05)；E-cadherin在BTCC组织中的表达低于正常黏膜(27.7%比89.2%，P<0.05)；Vimentin在BTCC组织中的表达高于正常黏膜(83.1%比20.0%，P<0.05)。(2) FOXQ1与E-cadherin表达呈负相关，与TGF-β1、Vimentin表达呈正相关，是EMT的正向调控因子。结论核转录因子FOXQ1与膀胱移行细胞癌分化和转移有关，可能通过调控上皮间质转化从而促进膀胱移行细胞癌的侵袭转移。第二部分短发夹RNA靶向沉默FOXQ1基因对膀胱癌上皮间质转化的逆转作用目的:观察转录因子FOXQ1基因沉默对膀胱癌T24细胞上皮间质转化的逆转，探讨其在促进肿瘤侵袭转移的作用机制。方法:构建针对FOXQ1基因的shRNA真核表达载体，脂质体Lipofactamine2000介导FOXQ1干扰质粒转染人膀胱癌细胞株T24细胞；转染48h后采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测FOXQ1、上皮间质标记物E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达改变；细胞划痕实验、Transwell小室侵袭实验检测体外细胞迁移和侵袭能力；噻唑蓝(MTT)比色法和AnnexinV-FITC/PI双染法检测shRNA对细胞增殖和凋亡的作用。结果:与转染NC-shRNA阴性对照组比较，转染FOXQ1-shRNA48h后的T24细胞，FOXQ1和间质标记基因N-cadherin、vimentin的mRNA或蛋白表达下降，而上皮标记基因E-cadherin的mRNA或蛋白表达显著增加；转染后的T24细胞形态向正常上皮细胞转化，体外迁移能力与侵袭力下降[(15.4±1.4)％比(76.5±1.1)％，P<0.05]；细胞增殖明显抑制(57.8％比82.7％，P<0.05)，同时细胞凋亡率增加(37.6％比14.2％，P<0.05)。结论:靶向沉默FOXQ1基因可以逆转肿瘤细胞的间质表型，向正常上皮表型转化，遏制癌细胞迁移和侵袭，降低肿瘤转移潜能。第三部分FOXQ1介导TGF-β1/Smad信号通路的作用研究目的观察FOXQ1基因沉默对TGF-β1诱导的上皮间质转化的影响，分析TGF-β1和FOXQ1在膀胱癌上皮间质转化中的作用及信号转导通路，进一步明确肿瘤侵袭转移的分子机制。方法采用脂质体介导的shRNA干扰技术将将真核质粒载体FOXQ1-shRNA和nc-shRNA转染BIU-87细胞，8小时后给予或不给5ng/ml TGF-β1，建立四组工作细胞系：(nc-shRNA)；(nc-shRNA+5ng/ml TGF-β1)；(FOXQ1-shRNA)；(FOXQ1-shRNA+5ng/ml TGF-β1)。40h后倒置显微镜观察细胞形态的变化，检测每组细胞FOXQ1的mRNA和蛋白表达情况；实时定量RT-PCR和Western blot检测上皮间质标记物E-cadherin，Vimentin。观察TGF-β1对FOXQ1表达水平和BIU-87细胞形态表型的调控，及敲低FOXQ1基因后对TGF-β1调控上皮间质标记物表达的影响。结果(nc-shRNA+5ng/ml TGF-β1)组与(nc-shRNA)组相比，在外源性TGF-β1作用下，膀胱癌BIU-87细胞形态发生变化，具有间质表型特征，FOXQ1的mRNA和蛋白表达上调；(FOXQ1-shRNA+5ng/ml TGF-β1)与(nc-shRNA+5ng/ml TGF-β1)组相比FOXQ1的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)，伴随E-cadherin表达上调，vimentin表达下调，BIU-87细胞形态获得上皮表型特征。结论TGF-β1诱导人膀胱癌细胞发生EMT，并调控FOXQ1基因mRNA和蛋白表达，FOXQ1是TGF-β1诱导EMT必不可少的下游转录因子。shRNA干扰能够成功的从基因水平和蛋白水平抑制TGF-β1诱导的FOXQ1表达，并且能够阻断BIU-87细胞的上皮间质转化过程。