论文部分内容阅读
目的:探讨自然铜、鹿衔草对裸鼠肺癌骨转移模型的骨转移抑制的机制。方法:取4周龄、体重15～20g裸鼠，每只裸鼠右胫骨骨髓腔内注射0.1 ml A549肺癌细胞悬液，21天后建立肺癌骨转移模型。将造模裸鼠随机分为自然铜组、鹿衔草组、联合给药组（自然铜与鹿衔草联合溶液）、阳性药物组（帕米磷酸二钠）及模型对照组。中药组模型裸鼠按6 g·kg-1剂量隔日灌胃自然铜、鹿衔草及两者联合液，每周腹腔注射生理盐水0.16ml;阳性药物组模型裸鼠按10 mg· kg-1剂量每周腹腔注射帕米磷酸二钠，隔天灌胃生理盐水0.5ml;模型对照组模型裸鼠隔日灌胃生理盐水0.5ml，隔周腹腔注射生理盐水0.16ml。给药三周后处死裸鼠，收集肿瘤标本。标本用4％多聚甲醛溶液固定、制作组织蜡块、切片后按照相关免疫组织化学方法步骤观察标本中ICAM-1、MMP-9、PTHrP的表达情况。标本在取下后冻存于-80℃冰箱，分批次提取RNA，按照逆转录PCR步骤获得cDNA，以实时荧光定量PCR(Real time quality PCR)方法检测ICAM-1、MMP-9、PTHrP基因的表达水平。结果:对比模型对照组，各给药组的ICAM-1、MMP-9的基因水平及蛋白的表达量均降低，差异有统计学意义（P＜0.01）;联合给药组、阳性药物组的PTHrP的基因水平及蛋白的表达量降低，有统计学差异（P＜0.05)。对比阳性药物组，各中药给药组的ICAM-1、MMP-9的基因水平及蛋白的表达量降低，有统计学差异（P＜0.05);各中药给药组的PTHrP的基因水平及蛋白表达量升高，差异显著（P＜0.01）。结论:自然铜、鹿衔草及其联合用药能通过抑制ICAM-1、MMP-9的表达水平进而发挥抑制肺癌骨转移的作用。自然铜、鹿衔草联合用药能通过抑制PTHrP表达水平进而发挥抑制肺癌骨转移的作用。