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目的：应用基因分子生物学技术在肺腺癌细胞中探讨Galectin-3与Phosphatase of Regenerating Liver-3(PRL-3)在RhoA-GTP磷酸化信号途径激活过程中的相互作用,为进一步研究肺腺癌细胞侵袭、转移能力增强的分子机制和肺腺癌分子治疗方法提供新的思路和实验依据。方法：1、使用携带Galectin-3mRNA外显子基因片段的GV208慢病毒质粒转染构建并筛选过表达Galectin-3的LTEP-a2肺腺癌细胞株。2、用脂质体转染的方法,将合成的靶向特异性siRNA使用Lipofectamine2000Transfection Reagent转染LTEP-a2及A549肺腺癌细胞,干扰Galectin-3和PRL-3蛋白的表达。3、使用荧光定量RT-PCR和Western blot方法在mRNA水平和蛋白表达水平检测Galectin-3、PRL-3和RhoA的表达情况。结果：1、A549细胞中使用靶向特异性siRNA单独阻断Galectin-3的表达后,PRL-3、RhoA蛋白的表达显著降低(P<0.01),提示Galectin-3影响PRL-3、RhoA两种蛋白的表达,进而调节RhoA-GTP信号途径的激活,影响肿瘤细胞的侵袭、转移能力。2、A549细胞使用siRNA单独阻断PRL-3后,RhoA蛋白表达减少(P<0.01),而Galectin-3的表达则无明显影响,提示PRL-3对RhoA蛋白的表达具有直接调节作用,推测Galectin-3可能是通过PRL-3间接调节RhoA-GTP磷酸化信号途径的激活。3、过表达Galectin-3的LTEP-a2肺腺癌细胞株在mRNA转录水平和蛋白表达水平同时上调PRL-3和RhoA的表达(P<0.01),进一步证实Galectin-3能够正向调节PRL-3和RhoA的表达,从而激活RhoA-GTP磷酸化信号途径。4、使用靶向PRL3-siRNA在过表达Galectin-3的LTEP-a2细胞中阻断PRL-3的表达,结果RhoA蛋白的表达也随之降低,证实PRL-3与RhoA蛋白的直接相关性。然而,相比于PRL-3表达的降低程度,RhoA蛋白的降低程度较少。结论：1、在肺腺癌细胞中,不仅存在Galectin-3通过PRL-3间接激活RhoA-GTP的磷酸化信号途径的方式,而且存在Galectin-3直接上调RhoA蛋白的表达进而激活RhoA信号的方式,此外,还可能存在通过PRL-3之外的其他蛋白间接激活RhoA-GTP磷酸化信号途径的方式,新的信号激活方式有待我们进一步研究证实。2、Galectin-3与PRL-3的相互作用可通过促进细胞的增殖、迁移等途径,在肺腺癌的转移、浸润进展过程中起重要作用,这些效应与RhoA-GTP信号途径的激活有直接关系。3、通过影响Galectin-3或PRL-3蛋白的表达或直接干扰其作用功能,调控RhoA-GTP磷酸化信号途径的激活,将针对Galectin-3或PRL-3表达的药物或靶向性干扰RNA应用到肺腺癌肿瘤中去,将是临床治疗肺腺癌的一个新的研究方向,具有十分广阔的应用前景,本研究进一步阐明了两者在肿瘤的发生发展中的作用,将有助于指导肺腺癌的个体化诊断、治疗,对两者的调控措施将来可能成为免疫及靶向治疗肺腺癌的有力手段。